豬高熱病細(xì)菌性病原的分離鑒定及其生物學(xué)特性研究.pdf

1、豬“高熱病”是由多種病原混合感染引起的綜合征，針對(duì)安徽地區(qū)豬群中廣泛流行的多病因“高熱病”進(jìn)行細(xì)菌性病原的研究對(duì)“高熱病”的防治具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。
　　 副豬嗜血桿菌（Haemophilus parasuis，HPS）、多殺性巴氏桿菌（Pasteurella multocida，Pm）、胸膜肺炎放線桿菌（Actinobacillus pleuropneumoniae，APP）形態(tài)學(xué)、生長(zhǎng)特性相似，臨床感染難以區(qū)分，本研究根據(jù)H

2、PS、Pm、APP的特異性序列，成功建立了復(fù)合PCR方法的快速診斷方法，該方法特異性好，可以檢測(cè)出HPS、Pm、APP最低量分別為60pg、120pg和50 pg的DNA，極大的提高了三種細(xì)菌的鑒定速度和效率，同時(shí)將該方法應(yīng)用于病死豬的病料檢測(cè)，結(jié)果顯示該方法可用于HPS、Pm、APP的臨床監(jiān)測(cè)。
　　 利用常規(guī)細(xì)菌分離鑒定結(jié)合建立的復(fù)合PCR方法，從安徽肥東、肥西、淮北、桐城、阜陽、宿州、六安、廬江、宣城、舒城十個(gè)地區(qū)的具有高

3、熱及呼吸系統(tǒng)癥狀的146頭發(fā)病或死亡豬中分離細(xì)菌67株，分離率為45.89％，其中SS20株，HPS12株，Pm16株，APP2株，分離率分別為29.85％；17.91％；23.88％；2.98％，初步了解到安徽地區(qū)的規(guī)?；i場(chǎng)及散養(yǎng)戶中廣泛存在的細(xì)菌感染情況。對(duì)16分離株P(guān)m進(jìn)行血清型鑒定發(fā)現(xiàn)12株為莢膜A型，占總數(shù)的75％，表明A型Pm是當(dāng)前安徽地區(qū)Pm的主要流行血清型；利用特異性引物對(duì)20株分離的SS進(jìn)行鑒定發(fā)現(xiàn)5株為2型豬鏈球菌

4、，陽性率25％；對(duì)安徽分離的12株HPS進(jìn)行了PCR-RFLP基因型的鑒定，12株HPS可分成5種不同的基因型；生長(zhǎng)特性表明2株APP均為生物Ⅰ型；藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明4種分離菌對(duì)14種抗菌素的敏感性不同，但都對(duì)氟苯尼考、頭孢噻肟、阿莫西林和環(huán)丙沙星敏感，這四種藥物可用于臨床防治。
　　 對(duì)安徽省HPS分離株轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合蛋白（tbpA）基因進(jìn)行擴(kuò)增和序列測(cè)定，根據(jù)序列同源性建立系統(tǒng)發(fā)生樹，并與RFLP分型結(jié)果進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)相同基因型