1、季節(jié)性凍融是全球中高緯度和高海拔地區(qū)普遍存在的現(xiàn)象，而全球變暖引起的季節(jié)性凍融變化必然直接或者間接作用于森林生態(tài)系統(tǒng)，從而對生態(tài)系統(tǒng)過程施加強烈的影響。作為森林生態(tài)系統(tǒng)重要的成分之一，土壤微生物在森林生態(tài)系統(tǒng)的物質循環(huán)和能量流動中具有十分重要的和不可替代的作用，并受到生物和非生物因素的綜合調控。但迄今為止的研究更集中在土壤凍結前和融化后的生長季節(jié)內，有關土壤凍結和融化過程中森林土壤微生物數(shù)量、種類、空間分布、群落結構變化及其多樣性等研究
2、仍然相對缺乏，這很難深入理解土壤微生物在高寒森林生態(tài)系統(tǒng)過程，如凋落物分解、養(yǎng)分元素的釋放與轉化、腐殖質的形成等過程中的功能和作用，更不利于理解未來氣候變化下該生態(tài)系統(tǒng)過程可能發(fā)生的變化。因此，本實驗以川西亞高山/高山地區(qū)分布范圍最廣和面積最大的冷杉(Abiesfaxoniana)原始林、紅樺(Betulaalbosinensis)+冷杉混交林、冷杉次生林為研究對象，采用PCR-DGGE的方法研究季節(jié)性凍融期土壤凍結階段和解凍階段土壤細
3、菌群落結構變化特征，探討三種森林群落土壤細菌群落結構對季節(jié)性凍融過程的響應，以期為深入認識亞高山/高山森林冬季土壤生態(tài)學過程提供基礎數(shù)據(jù)。
(1)在土壤季節(jié)性凍結期間，3個森林群落土壤有機層的細菌條帶數(shù)均大于礦質層，并且兩個層次的細菌條帶總數(shù)在凍結前表現(xiàn)為：MF＞SF＞PF，而土壤完全凍結后則表現(xiàn)為：PF＞MF＞SF，3個森林群落土壤的細菌條帶總數(shù)下降率分別達到18％(PF)、38％(MF)和40％(SF)；在土壤融化期間
4、，3個森林群落土壤有機層的細菌條帶數(shù)較礦質層低，總數(shù)表現(xiàn)為：PF＞SF＞MF，但細菌條帶總數(shù)隨著解凍過程呈現(xiàn)先下降后升高的趨勢，均在4月達到最低點，3個森林群落土壤的細菌條帶總數(shù)上升率分別達到54％(PF)、41％(MF)和49％(SF)，在生長季節(jié)里總數(shù)表現(xiàn)為：SF＞MF＞PF。這些結果說明季節(jié)性凍融對3個森林群落土壤有機層和礦質層的細菌種群數(shù)量產生不同程度的影響。
(2)Shannon-Wiener指數(shù)(H)、均勻度(
5、EH)、Simpson優(yōu)勢度指數(shù)(C)也具有相似的變化趨勢。土壤完全凍結后，3個森林群落不同層次土壤細菌的Shannon-Weiner指數(shù)均明顯減小。MF群落2個土層的土壤細菌均勻度(EH)指數(shù)在凍結后表現(xiàn)出減小的趨勢，但PF、SF群落中的均勻度(EH)指數(shù)在凍結前后無顯著差異。相反，PF和MF群落土壤細菌的Simpson優(yōu)勢度指數(shù)(C)在土壤凍結后明顯增加。而在土壤解凍期，3個森林不同土壤層次的樣品，其Shannon-Wiener指數(shù)
6、和均勻度均表現(xiàn)出隨土壤解凍先降低再升高的趨勢，但其達到谷值的時間不同，而Simpson優(yōu)勢度指數(shù)表現(xiàn)出先升高再降低的趨勢。
(3)3個森林土壤有機層和礦質層中細菌群落組成表現(xiàn)出較大的變異性（相似性48％～92％），同時表現(xiàn)出明顯的季節(jié)性變化，季節(jié)性凍融前后，3種森林群落土壤細菌類群聚類存在較大的差異，說明季節(jié)性凍融對土壤微生物細菌群落結構有重要影響。
(4)通過測序和對比同源性分析，3個森林群落有機層和礦質層
7、上壤樣品里含有厚壁菌門(Firmicutes)，變形細菌門(Proteobacteria)和擬桿菌門(Acidobacteria)，綠彎菌門(Chloroflexi),Band7與藍細菌(Cyanobacterium)和脫鐵桿菌目(Deferribacterales)同源性高。Band5和Band9都與變形細菌門(Proteobacteria)，且同源性都為100％。有一個樣品含有的是未經(jīng)鑒定的細菌克隆，同源性為96％。這些結果表明亞高
8、山/高山森林在凍融季節(jié)極端環(huán)境變化條件下仍然具有相對豐富的耐寒優(yōu)勢微生物種群，以維持冬季土壤生態(tài)過程的持續(xù)進行。
綜上所述，亞高山/高山地區(qū)的季節(jié)性凍融變化對森林土壤微生物群落結構具有重要影響。盡管在土壤經(jīng)歷凍結后，森林群落土壤各層次細菌類群大量死亡，凍結過程顯著降低了土壤細菌類群的豐富度及多樣性，但一定程度上提高了土壤細菌種群的優(yōu)勢度，而土壤解凍過程造成激烈的土壤水熱動態(tài)變化，進一步加大了對土壤細菌群落結構的影響。這種由
