生長調(diào)節(jié)物質(zhì)對梨極矮化突變體生長的影響及GA20-氧化酶基因克隆.pdf

1、本研究為了探索梨極矮化突變體的矮化機(jī)理，研究了生長調(diào)節(jié)物質(zhì)對梨極矮化突變體生長的影響；以梨極矮化突變體及蘋果梨的葉片為試材，應(yīng)用RT-PCR擴(kuò)增技術(shù)，克隆了GA20-氧化酶基因的編碼區(qū)全長；成功構(gòu)建了克隆基因的植物雙元表達(dá)載體，為該基因的遺傳轉(zhuǎn)化奠定了基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下：
　　梨極矮化突變體對外源赤霉素、生長素、多效唑敏感，可能屬GA缺陷型。
　　利用 RT-PCR技術(shù)從梨極矮化突變體中克隆到一個(gè) GA20-氧化酶基因的

2、全長cDNA，該序列全長1179bp，包含一個(gè)完整的編碼392個(gè)氨基酸的開放閱讀框（ORF），命名為 PuGA20ox。氨基酸序列的多重比對表明，PuGA20ox與 PcGA20-ox、MdGA20-ox、FsGA20-ox、CiGA20-ox的同源性分別為98％、92%、81%、74%。結(jié)構(gòu)分析顯示，PuGA20ox編碼的氨基酸序列具有典型的GA20-氧化酶特征，具有共同的保守氨基酸結(jié)構(gòu)域。
　　利用RT-PCR技術(shù)從蘋果梨中克

3、隆到一個(gè)GA20-氧化酶基因的全長cDNA，該序列全長1179bp，包含一個(gè)完整的編碼392個(gè)氨基酸的ORF，命名為PbGA20ox。氨基酸序列的多重比對表明，PbGA20ox與PcGA20-ox、MdGA20-ox、FsGA20-ox、CiGA20-ox的同源性分別為99%、92%、82%、75%。結(jié)構(gòu)分析顯示，PbGA20ox編碼的氨基酸序列具有典型的GA20-氧化酶特征，具有共同的保守氨基酸結(jié)構(gòu)域。
　　成功構(gòu)建了PuGA2