奶牛泌乳相關(guān)激素周期性變化規(guī)律及激素對(duì)乳腺外植體中基因表達(dá)的影響.pdf

1、為了揭示激素對(duì)乳腺泌乳的調(diào)控作用及奶牛產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要性，同時(shí)也為全面系統(tǒng)的揭示奶牛泌乳功能的分子生物學(xué)機(jī)制尋找突破點(diǎn)，以提供系統(tǒng)的理論依據(jù)和試驗(yàn)根據(jù)，本課題研究了奶牛整個(gè)生產(chǎn)周期中泌乳相關(guān)激素的變化規(guī)律以及激素與產(chǎn)奶性能之間的相關(guān)性。此外，還對(duì)各激素單獨(dú)或聯(lián)合作用對(duì)奶牛乳腺外植體基因表達(dá)的影響進(jìn)行了研究。
　　 試驗(yàn)一：選取3頭相同泌乳生理的荷斯坦奶牛定期采取血樣及乳樣，采用放射性免疫法測定血清中各激素含量，并通過乳成分自動(dòng)分析

2、儀對(duì)乳成分進(jìn)行分析。結(jié)果表明，奶牛整個(gè)生產(chǎn)周期中血清中E2含量變化顯著(P<0.0001)。產(chǎn)前E2含量處于較高水平，產(chǎn)后直到干奶期則相對(duì)處于較低水平；血清中P4含量變化顯著(P<0.05)。產(chǎn)前P4含量處于較高水平，到產(chǎn)后15天一直處于較低水平。泌乳40天至干奶期P4含量則一直處于較高水平；血清中PRL含量變化顯著(P<0.0001)。其中，圍產(chǎn)期血清中PRL含量比較穩(wěn)定，圍產(chǎn)期至泌乳40天含量急速下降，泌乳40天至270天顯著增加，

3、干奶期則保持穩(wěn)定的低水平；血清中T4含量變化顯著(P<0.0001)。圍產(chǎn)期T4含量整體處于較低水平，泌乳期至干奶期T4含量則一直處于較高水平并表現(xiàn)出一定的增長趨勢；血清中GH含量變化不顯著(P>0.05)；血清中INS含量變化顯著(P<0.0001)。其中，圍產(chǎn)期血清中INS含量一直處于較低水平，泌乳40天至270天含量較高，干奶期有一定程度的下降；血清中G含量變化顯著(P<0.001)。其中，產(chǎn)前血清中G含量較高，產(chǎn)后處于較低水平，

4、泌乳40天至270天含量基本穩(wěn)定，干奶期則有一定程度的上升；血清中IGF-I含量變化顯著(P<0.05)。其中，圍產(chǎn)期血清中IGF-I含量呈先增后減趨勢，泌乳40天至270天含量基本穩(wěn)定，干奶期則同樣呈先增后減的趨勢。奶牛泌乳期間產(chǎn)奶量、乳蛋白和乳糖變化顯著(P<0.0001)，而乳脂含量變化不顯著(P>0.05)。產(chǎn)奶量與血清中E2、PRL及G之間呈顯著性負(fù)相關(guān)(P<0.05)。乳蛋白與血清中E2、P4及G之間呈顯著性正相關(guān)(P<0.

5、05)。乳脂與血清中P4之間呈顯著性負(fù)相關(guān)(P<0.05)。乳糖與血清中E2、PRL、IGF-I及G之間呈顯著性負(fù)相關(guān)(P<0.01)。上述結(jié)果表明，奶牛泌乳周期中，八種激素均呈特征性變化：相關(guān)分析表明：產(chǎn)奶量主要受E2、PRL及G影響；乳脂主要受P4影響；乳蛋白主要受E2、P4及G影響；乳糖主要受E2、PRL、G及IGF-I影響。
　　 試驗(yàn)二：體外培養(yǎng)奶牛乳腺組織，并進(jìn)行不同的激素處理，采用RT-PCR相對(duì)定量方法檢測乳腺外

6、植體中相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果表明，培養(yǎng)基內(nèi)不同濃度的催乳素處理對(duì)ACC、FAS及STAT5mRNA的表達(dá)產(chǎn)生顯著影響(P<0.01)。生理濃度下三者表達(dá)量均最低，低于生理濃度時(shí)表達(dá)量較高，當(dāng)PRL濃度為生理濃度2倍時(shí)其表達(dá)量最高；IGFBP5mRNA的表達(dá)在低于生理濃度時(shí)表達(dá)量最高(P<0.05)，但對(duì)(αs1-casein合成沒有顯著影響。不同濃度的生長激素處理對(duì)ACC、FAS及STAT5mRNA的表達(dá)影響顯著(P<0.01)，高于生理

7、濃度2倍時(shí)其表達(dá)量顯著下降，但隨著濃度升高表達(dá)量稍有增加；生理濃度3倍時(shí)顯著抑制αs1-caseinmRNA的表達(dá)(P<0.05)，但隨后其表達(dá)受到抑制。不同濃度的氫化可的松處理僅對(duì)STAT5及IGFBP5mRNA的表達(dá)產(chǎn)生顯著影響(P<0.05)，其中低于生理濃度時(shí)顯著抑制STAT5mRNA的表達(dá)，隨著濃度升高其表達(dá)較平穩(wěn)，IGFBP5mRNA的表達(dá)則在低于生理濃度處于最高水平。PRL、GH及H不同組合處理中，GH+H處理后ACC、F