濰坊地區(qū)小鵝瘟流行現(xiàn)狀調(diào)查和防制的研究.pdf

1、經(jīng)過病料采集、病料處理和鵝胚尿囊腔接種試驗，從山東濰坊的高密、諸城、臨朐、昌樂等地分離到30株病毒。其中27株經(jīng)瓊脂擴散試驗、鵝胚中和試驗、小鵝瘟病毒分離株人工感染試驗以及血凝試驗被確定為小鵝瘟病毒。并對小鵝瘟病鵝群的所在地域、品種、日齡、數(shù)量、發(fā)病率、死亡率、發(fā)生月份、免疫方式、管理方式等相關情況進行了調(diào)查。調(diào)查統(tǒng)計結(jié)果表明：濰坊地區(qū)小鵝瘟主要發(fā)生于4～8月份，其中5～7月份出現(xiàn)的頻率最高。它可使不同品種的鵝發(fā)病，其主要發(fā)病同齡為1～

2、21日齡。而且發(fā)病鵝的發(fā)病日齡越小，死亡率越高。7日齡以內(nèi)的雛鵝發(fā)病，其死亡率可超過90％。在30個疑似小鵝瘟的病鵝群中，有50％的病鵝群存在細菌感染，有26.7％的病鵝群存在病原性大腸桿菌的感染。由此可見，小鵝瘟和細菌病，尤其和大腸桿菌的混合感染已成為養(yǎng)鵝業(yè)中一個值得重視的問題。 利用瓊脂擴散試驗測定了小鵝瘟病鵝群血清中的小鵝瘟病毒的抗體效價，為科學制定鵝的免疫程序提供依據(jù)。對人工感染試驗中致病性較強的小鵝瘟病毒臨朐分離株I進

3、行了EID50測定，測得結(jié)果為10-6.5，0.3ml。為進一步研究小鵝瘟病毒的毒力變化打下了基礎。用分離到的27株小鵝瘟病毒分別接種8日齡易感小鵝，其發(fā)病率為100％，死亡率為50％～100％。小鵝瘟病毒臨朐分離株I具有良好的免疫原性，用它制備的的小鵝瘟油乳劑滅活苗安全有效。應用小鵝瘟病毒臨朐分離株I的高免卵黃抗體，預防小鵝瘟時，對小鵝的保護率達100％，治療小鵝瘟時康復率可達91.7％。雛鵝發(fā)生小鵝瘟后，越早使用卵黃抗體，治療效果越

4、好。對臨朐自然發(fā)病雛鵝的治療試驗表明：小鵝瘟病毒臨朐分離株I的卵黃抗體的治愈率比市售的卵黃抗體的治愈率提高了8％。這可能與免疫接種的油苗含有小鵝瘟病毒當?shù)刂暧嘘P。 根據(jù)GenBank中小鵝瘟病毒VP3基因全序列，設計了一對特異性引物，預期擴增片段大小為375bp。提取病毒DNA進行PCR反應，成功擴增出375bp的特異條帶。將PCR產(chǎn)物純化后，與pMD18-T載體連接，連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細胞TG1，經(jīng)AMP篩選和PCR鑒