半夏組織培養(yǎng)研究.pdf

1、半夏[Pinellia ternata(Thunb.) Briet.]是一種重要的傳統(tǒng)中藥材，具有鎮(zhèn)咳、祛痰、鎮(zhèn)痛、抗生育、抗腫癌、提高記憶之活性，具有很好的發(fā)展前景。 據(jù)統(tǒng)計，在558種中藥處方中，半夏被列為使用頻率最高的30種中藥的第22位，市場需求很大。但自然條件下，半夏主要靠珠芽、塊莖進行無性繁殖，繁殖系數(shù)低，加上耕作制度的改革和化學除草劑的使用使其野生資源遭到嚴重破壞。另外半夏長期無性繁殖過程中易感染病毒，其產(chǎn)量和藥用

2、成分含量均明顯下降。 本論文以半夏塊莖作為材料，探討了不同生長調節(jié)物質及濃度對半夏塊莖及外植體的誘導效應，建立了半夏組織培養(yǎng)快速繁殖體系、篩選出誘導疏松愈傷組織的培養(yǎng)基，從而為半夏藥用成分的測定及綜合開發(fā)利用奠定了基礎。主要實驗結果如下： 1、以半夏的塊莖為外植體，接種于附加不同生在調節(jié)物質MS培養(yǎng)基上，均能產(chǎn)生愈傷組織。1.0mg/L2，4-D有利于愈傷組織的誘導；0.5mg/L IAA有利于胚狀體的產(chǎn)生，較適合用于小

3、塊莖的誘導；NAA的主要作用為誘導愈傷組織生根，MS+2.0mg/L NAA是誘導半夏塊莖外植體的生根培養(yǎng)基；MS+0.5mg/L KT是較適宜的塊莖誘導和增殖的培養(yǎng)基。 2、以半夏葉片、葉柄為外植體，接種于通過單因素誘導試驗和正交試驗設計的不同生長調節(jié)物質及濃度的培養(yǎng)基中，進行誘導培養(yǎng)。結果表明：低濃度的生長素和細胞分裂素均有利于半夏外植體小塊莖的誘導，0.2mg/L IAA和0.5mg/L6-BA誘導率較高；當濃度達到1.0

4、mg/L時，IAA誘導的葉片外植體能產(chǎn)生數(shù)量很多的小塊莖，但由于數(shù)目過多影響了小塊莖的萌發(fā)。KT、ZT先誘導出白色愈傷組織，再由白色愈傷組織分化出小塊莖從而減慢了小塊莖的萌發(fā)速度；當濃度增至2.0mg/L時，2，4-D誘導產(chǎn)生大量被絨毛的粗根，NAA誘導產(chǎn)生致密的長根，從而抑制了小塊莖的產(chǎn)生。通過正交實驗篩選出誘導半夏成苗最佳培養(yǎng)基：MS+0.5mg/L IAA+0.5mg/L KT+0.5mg/L6-BA。50天后對這種培養(yǎng)基上的再生

5、小植株進行移栽，兩周后進行統(tǒng)計，移栽成活率達95％以上。 3、采取兩因素和正交實驗的方法，篩選最佳的生長調節(jié)物質配比的培養(yǎng)基誘導半夏的疏松愈傷組織。在兩因素生長調節(jié)物質配比的試驗中，3.0mg/L2，4-D與1.0mg/L6-BA誘導的愈傷組織狀態(tài)好，生長速度較快，為疏松的愈傷組織；在正交實驗中，將半夏的葉片和葉柄接種在附加1.0mg/L2，4-D+1.0mg/L KT+1.0mg/L6-BA的MS培養(yǎng)基上可誘導形成疏松愈傷組織