狹葉柴胡營養(yǎng)器官的發(fā)育解剖學(xué)及其柴胡皂苷的細(xì)胞化學(xué)定位研究.pdf

1、狹葉柴胡(Bupleurum scorzonerifolium Willd.)是傘形科柴胡屬多年生草本植物。是我國大宗中藥材之一，藥用歷史悠久。由于其藥用價(jià)值顯著，故其研究受到廣泛的關(guān)注并滲透到各方面，主要集中在生物學(xué)、化學(xué)成分、栽培育種、藥理作用及臨床應(yīng)用等方面，但其主要藥用成分柴胡皂苷的細(xì)胞定位尚未見報(bào)道。因此，本文采用植物解剖學(xué)、組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)等技術(shù)研究了狹葉柴胡營養(yǎng)器官的結(jié)構(gòu)和發(fā)育及其有效成分柴胡皂苷的組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)定位

2、。主要研究結(jié)果如下：
　　 ⑴狹葉柴胡根、莖葉的發(fā)育過程與一般多年生雙子葉植物的發(fā)育規(guī)律一致。根的初生木質(zhì)部多為二原型，少數(shù)為三原型；成熟根的結(jié)構(gòu)以次生結(jié)構(gòu)為主。多年生根與一年生根的結(jié)構(gòu)基本相似，但在各部分的細(xì)胞數(shù)量和組成上存在差異。分泌道在一年生的根中僅分布在中柱鞘薄壁組織中，而在多年生的根中，在中柱鞘薄壁細(xì)胞和次生韌皮部中均有分布。葉的發(fā)育包括原分生組織、初生分生組織和成熟結(jié)構(gòu)3個(gè)階段，其葉為典型的等面葉。分泌道在莖中主要分

3、布在皮層和髓中，在葉中分布在維管束中，且這些分泌道均屬初生分泌道。
　　 ⑵狹葉柴胡根、莖、葉的組織化學(xué)研究結(jié)果表明：在根、莖、葉的不同發(fā)育時(shí)期，柴胡皂苷的分布與含量不同，柴胡皂苷在根的發(fā)育早期主要分布于皮層，次生結(jié)構(gòu)中主要分布在中柱鞘和形成層中；在莖中主要分布在成熟莖的皮層；葉中，則在成熟葉的整個(gè)葉肉組織中有少量分布。
　　 ⑶用醋酸鉛溶液對狹葉柴胡根內(nèi)的藥用成分柴胡皂苷進(jìn)行細(xì)胞化學(xué)定位，在透射電鏡下探討不同發(fā)育時(shí)期根

4、的結(jié)構(gòu)特征與柴胡皂苷積累的關(guān)系。結(jié)果表明：狹葉柴胡根的初生結(jié)構(gòu)和次生結(jié)構(gòu)類似一般雙子葉植物。在根的初生分生組織中表皮原及皮層原均有皂苷的分布。在根的初生結(jié)構(gòu)中，柴胡皂苷分布于表皮、皮層、中柱鞘、初生韌皮部及原生木質(zhì)部的薄壁組織細(xì)胞內(nèi)，其中中柱鞘和韌皮部是主要的分布部位。在根的次生結(jié)構(gòu)中，柴胡皂苷主要分布于中柱鞘和次生韌皮部薄壁組織細(xì)胞內(nèi)，在次生木質(zhì)部及形成層中也有少量分布。高爾基體可能與皂苷的合成有關(guān)，而且胞間連絲參與皂苷的運(yùn)輸。

5、>　　 ⑷運(yùn)用膠體金免疫定位技術(shù)對狹葉柴胡根、莖和葉中的柴胡皂苷d(SSd)進(jìn)行精確定位，研究結(jié)果表明SSd隨著細(xì)胞的成熟，金顆粒的分布有改變；在根、莖、葉中的分布有明顯區(qū)別，在根中的分布要明顯多于莖葉，莖中含量最少；金標(biāo)顆粒(利用透射電子顯微鏡觀察)主要分布于各部位的液泡，在某些部位的原生質(zhì)中也有顆粒，細(xì)胞器上很少有金顆粒的存在。這個(gè)結(jié)果表明液泡是SSd的主要貯藏部位。對照組中很少發(fā)現(xiàn)金顆粒標(biāo)記。該實(shí)驗(yàn)為柴胡細(xì)胞中SSd的分布提供了