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文檔簡(jiǎn)介
1、本研究為探索特種水生蔬菜刺苦草無性繁殖的有效途徑,對(duì)組織培養(yǎng)過程中的消毒方法、培養(yǎng)基種類、外植體選用、光照溫度處理、生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的選擇等方面進(jìn)行了比較研究。著重研究芽尖組織培養(yǎng)程序的最佳培養(yǎng)基配方,建立刺苦草組織培養(yǎng)技術(shù)體系。結(jié)果表明:
1.以刺苦草根狀莖的側(cè)芽作為外植體,進(jìn)行消毒藥品的選擇表明先用70%酒精消毒30s,再用0.1%HgC12加吐溫20(3~5滴)消毒12min,消毒效果最好;
2.刺苦
2、草的芽尖的初代組織培養(yǎng)中,MS培養(yǎng)基比N6培養(yǎng)基生長(zhǎng)效果和成活率要好,因此選擇MS為基本培養(yǎng)基;加入瓊脂量為7.5g左右,固態(tài)培養(yǎng)基培養(yǎng);
3.不同器官作外植體,在相同條件下對(duì)根狀莖、葉片、芽尖進(jìn)行誘導(dǎo),芽尖形成的愈傷組織結(jié)構(gòu)緊密,顏色偏綠;芽尖的啟動(dòng)d數(shù)最短5d,葉片次之7d,根狀莖啟動(dòng)最慢15d;芽尖成活率最高污染率最低分別為77.5%和20%,且易培養(yǎng)出完整植株;葉片、莖段成功地誘導(dǎo)出愈傷組織,誘導(dǎo)率極低,但未實(shí)現(xiàn)從
3、愈傷組織的植株再生;因此外植體最好選擇根狀莖側(cè)芽的芽尖;
4.以芽尖作為試驗(yàn)材料,組織培養(yǎng)的最佳光照條件為遮光處理2周后(1000LX)再采用正常光照(1500LX)較好;最佳培養(yǎng)溫度為20℃左右;
5.細(xì)胞分裂素濃度高于生長(zhǎng)素則促進(jìn)細(xì)胞分化,在6BA和NAA相互作用時(shí),芽尖初代成活率隨著6BA濃度的增加而降低。6BA0.2mg/L+NAA1.0mg/L時(shí),轉(zhuǎn)綠率和分化率達(dá)到最高為92.8%和85.7%;6B
4、A和IBA相互作用時(shí),IBA和6BA濃度的變化對(duì)其成活率影響較小。此時(shí)選擇MS+6BA2.0mg/L+IBA1.0mg/L為好,其成活率和轉(zhuǎn)綠率最大達(dá)到71.4%和75%。即初代培養(yǎng)最佳組合是MS+6BA0.2mg/L+NAA1.0mg/L,或MS+6BA2.0mg/L+IBA1.0mg/L。
6.相同IBA或NAA條件下,6BA為2.0 mg/L時(shí)的增殖系數(shù)分別低于1.0 mg/L時(shí)的增殖系數(shù),且MS+6BA1.0mg/
5、L+IBA0.5mg/L和MS+6BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L為兩處理的最佳水平。MS+6BA1.0mg/L+ NAA0.1mg/L條件下,30d、60d、90d的繁增殖倍數(shù)分別高于其他于處理,達(dá)到1.60、2.22和4.25,即適合植株增殖的培養(yǎng)基配方最佳組合為:MS+6BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。
7.MS+6BA+NAA處理下,6BA為0,NAA為0.1mg/L,生根率最高,達(dá)到51%,平均
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