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文檔簡介
1、從四川省犍為縣榨鼓鄉(xiāng)采集了生姜連作土壤,包括患病生姜根際土壤和非根際土壤,正常生姜根際土壤和非根際土壤,采用稀釋平板法測(cè)定了土壤微生物類群的數(shù)量,分別測(cè)定了土壤過氧化氫酶、脲酶、中性磷酸酶和微生物量C、N。采用稀釋平板法分離獲得38株細(xì)菌,應(yīng)用16S rDNA PCR-RFLP、16S rRNA基因全序列分析,研究了這些細(xì)菌的遺傳多樣性,確定了其系統(tǒng)發(fā)育及分類地位;采用PCR-DGGE研究了土壤微生物的遺傳多樣性。其結(jié)果如下:
2、 1.患病生姜根際土壤細(xì)菌明顯增多,放線菌和真菌顯著下降,而患病生姜的非根際土壤放線菌有明顯增加,真菌和細(xì)菌變化不明顯。
2.患病生姜根際土壤的中性磷酸酶,脲酶活性降低,過氧化氫酶增加,表明根系分泌物對(duì)脲酶、中性磷酸酶活性具有抑制作用,而對(duì)過氧化氫酶活性有促進(jìn)作用。
3.16S rDNA PCR-RFLP分析結(jié)果表明,在75%相似性水平處,38株細(xì)菌分為6個(gè)遺傳群。供試菌株表現(xiàn)出一定的差異性,呈現(xiàn)出豐富的
3、多樣性。
4.在上述實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,選取了SJ1-4、SJ1-5、SJ1-6、SJ1-9、SJ1-10、SJ1-11、SJ2-1、SJ2-4、SJ2-8、SJ3-5、SJ4-2、SJ4-3、SJ4-5共13株代表菌株測(cè)定了16SrDNA序列,進(jìn)而構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)育樹關(guān)系。結(jié)果表明,13個(gè)代表菌株分布于6個(gè)系統(tǒng)發(fā)育分支,分別為假單胞菌屬(Pseudomonas)、不動(dòng)桿菌屬(Acinetobacter)、芽孢桿菌屬(Bacillus
4、)、腸桿菌屬(Enterobacter)、鞘氨醇桿菌屬(Sphingobacterium)、溶桿菌屬(Lysobacter)。
5.對(duì)土壤DNA的PCR-DGGE分析結(jié)果表明,患病生姜根際土壤和正常生姜根際土壤細(xì)菌聚類在一起,且細(xì)菌種群相似性較高,達(dá)到70%左右,顯示它們之間具有比較相似的種群結(jié)構(gòu)。
在真菌種群聚類中,患病生姜根際土壤與正常生姜根際土壤聚在一起,患病生姜非根際土壤和正常生姜非根際土壤聚類在一起
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