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文檔簡介
1、<p> 廈門大學2013年招收攻讀碩士學位研究生入學考試試題 </p><p> 科目代碼:620 </p><p> 科目名稱:細胞生物學 </p><p> 招收專業(yè):生命科學學院、化學系、海洋與地球學院、環(huán)境與生態(tài)學院、藥學院各相關專業(yè) 考生須知:答題書寫須使用黑(藍)色字跡鋼筆、簽字筆或圓珠筆;各類答案 (包括選擇題、填空題)均
2、必須寫在答題紙上規(guī)定處,不得直接在試卷(試卷紙)或草稿紙上作答:凡未按上述規(guī)定作答均不予評閱、判分,后果考生自負。 </p><p> 一、名詞解釋(5題,每題6分,共30分} </p><p> 1. 端粒(Telomere): </p><p> 2. 紡錘體組裝監(jiān)控點(Spindle assembly checkpoint):</p&g
3、t;<p> 3. 胚胎干細胞(embryonic stem cell):</p><p> 4. 粘著斑(Focal adhesion):</p><p> 5. 細胞衰老(cell senescence):</p><p> 二、是非題(20題,每題1分,共20分。請將答案按題目序號寫在答題紙上,答“是”寫“V”,答“非”寫“X”) &l
4、t;/p><p> 1.氯霉素抑菌是因其可抑制原核70S核糖體肽酰轉移酶。 </p><p> 2.線拉體通過ATP合成酶參與細胞凋亡。 </p><p> 3.前體rRNA甲基化的重要性在于防止前體rRNA被加工。 </p><p> 4.催化三羧酸循環(huán)、脂肪酸和丙酮酸氧化等有關的主要酶類存在于線粒體的脊上。 </p>&
5、lt;p> 5.在自然條件下,有遺傳效應的染色體交換發(fā)生在非同源染色體的姊妹染色體之間。 </p><p> 6.啤酒酵母的交配型轉變(Mating-type interconversion)機制屬于轉錄后水平調控。 </p><p> 7.哺乳類動物體內唯一能產生抗體免疫球蛋白分子的細胞是Tc細胞。 </p><p> 8.原核細胞的呼吸酶定位在類核
6、區(qū)內。 </p><p> 9.真核細胞染色體的每個細胞周期中僅復制一次因為S期時間很短。 </p><p> 10.In situ hybridization是將基因定位于染色體上的研究手段。 </p><p> 11.瘤細胞通常由正常細胞轉化而來,與原來的細胞相比,癌細胞的分化程度通常表現為分化程度高。 </p><p> 1
7、2.白細胞表面抗原CD45是一種受體酪氨酸磷酸脂酶。 </p><p> 13.推動細胞周期由G2相向M相過渡的驅動器為CDK1。</p><p> 14.細胞中具有催化功能的成份是蛋白質與核酸。 </p><p> 15.與真核細胞相比,原核細胞在DNA復制、轉錄與翻譯上具有時空連續(xù)性的特點。 </p><p> 16.溶酶體在動物
8、、植物、原生動物和細菌中均有存在。 </p><p> 17.特異顯示DNA在細胞中分布的方法是PAS反應。 </p><p> 18.染色質纖維上非組蛋白的主要功能是調控基因表達。 </p><p> 19.突變后的Ras蛋白不能結合GTP,從而使Ras蛋白維持于活化狀態(tài),不斷激活靶分子,導致細胞大量增殖,而發(fā)生惡性轉化。 </p><p
9、> 20.冰凍蝕刻技術主要用于隧道顯微鏡。 </p><p> 三、選擇題〈每題可能多個答案,多遠或漏選皆不得分;15題,每題2分,共30分〉 </p><p> 1. 流式細胞術可用于測定: </p><p> A、細胞的大小和特定細胞類群的數量</p><p> B、分選出特定的細胞類群 </p><
10、p> C、細胞中DNA、RNA或某種蛋白的含量 </p><p> D、以上三種功能都有 </p><p> 2. 在粗面內質網上合成的蛋白質包括: </p><p> A、線粒體中的蛋白質B、分泌蛋白 C、膜蛋白 D、溶酶體中的蛋白 </p><p> 3. 能抑制CDK活性的酶是: </
11、p><p> A、Weel B、CAK C、cdc25 D、p21 </p><p> 4. 所有膜蛋白都具有方向性,其方向性在什么部位中確定: </p><p> A、細胞質基質 B、高爾基體 C、內質網 D、質膜 </p><p&g
12、t; 5. 屬于蛋白酪氨酸激酶類型的受體是: </p><p> A、EGF受體 B、PDGF受體 C、TGFβ受體 D、IGF-1受體 </p><p> 6. 下列技術中能用于研究膜蛋白流動性的方法是:</p><p> A、熒光抗體免疫標記B、熒光能量共振轉移 C、光脫色熒光恢復D、熒光標記細胞融合 <
13、/p><p> 7. 中心粒和鞭毛的基粒: </p><p> A、都是9+2結構 B、前者是9+2結構,后者是9+0結構 </p><p> C、都是9+0結構 D、前者是9+0結構,后者是9+2結構 </p><p> 8. 下列結構中屬于細胞膜上的結構有: </p><p> A、內吞
14、小泡 B、有被小窩 C、脂質筏 D、微囊 </p><p> 9. 纈氨霉素是一種可動離子載體,運輸:</p><p> A、Na+ B、K+ C、Ca2+ D、Mg2+ </p><p> 10. 線粒體參與細胞凋亡通過: </p><p&g
15、t; A、釋放細胞色素C B、釋放Ach E C、合成酶ATP D、SOD </p><p> 11. 關于第一次減數分裂下列觀點中哪些是錯誤的? </p><p> A、同源染色體不分裂 B、著色粒不分裂 C、染色單體分離 D、不出現交叉 </p><p> 12. 關于核孔復合體正確的論述有:
16、 </p><p> A、有核定位信號的蛋白進入細胞核不需要核孔復合體 </p><p> B、介導蛋白質入核轉運,介導RNA、核糖核蛋白顆粒出核轉運 </p><p> C、核蛋白通過核孔復合體由細胞質轉運到核內需要能量 </p><p> D、生物分子通過被動擴散和主動運輸進出核孔復合體 </p><
17、p> 13. 內質網中含有的可以識別不正確折疊的蛋白并促使其重新折疊:</p><p> A、Bip蛋白 B、Sec61蛋白 C、鈣結合蛋白 D、蛋白二硫鍵異構酶 </p><p> 14. 存在于真核細胞的細胞膜上質子泵是: </p><p> A、P型質子泵 B、V型質子泵 C、H+
18、-ATP酶 D、三種都有 </p><p> 15. 活性染色質具有如下哪些特性: </p><p><b> A、甲基化程度高</b></p><p> B、H2B的低磷酸化 </p><p> C、很少有組蛋白H1與其結合</p><p> D、組蛋白乙?;潭雀?&l
19、t;/p><p> 四、問答題(4題,每題10分, 共40分〉 </p><p> 1. 試述膜流動性的生物學意義。 </p><p> 2. 請根據溶酶體的形成過程,說明溶酶體不同階段及其功能的特點。 </p><p> 3. 請說明免疫熒光細胞化學中熒光抗體示蹤(免疫熒光細胞化學)的技術原理、方法與實驗步驟及其在細胞生物學研
20、究中的應用。 </p><p> 4. 2012年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎授予英國發(fā)育生物學家約翰、戈登(John Gurdon)與日本京都大學教授山中伸彌(Shinya Yamanaka )。兩位科學家取得的成果都與誘導多功能干細胞(iPS)相關。試論述iPS的在生物醫(yī)學科學領域中的理論與實踐意義。 </p><p> 五、實驗與分析題(3題, 每題10分,共30分〉 &l
21、t;/p><p> 1. 細胞劃痕實驗是指將細胞培養(yǎng)在培養(yǎng)皿或平板上,待細胞融合后用細胞刮在中央區(qū)域畫一條線,這條線內的細胞被機械力去除掉了,然后將細胞繼續(xù)培養(yǎng),觀察細胞向無細胞的劃痕區(qū)域遷移的情況,來判斷細胞的遷移能力。某課題組,為研究mTOR基因對腫瘤遷移能力的影響,以敲減細胞中mTOR基因為實驗組,對照正常細胞進行劃痕實驗,結果如下圖: 依據上述信息后,請作答: </p><p&g
22、t; (1) 何為基因敲減(gene knock-down)? </p><p> ?。?) mTOR在腫瘤細胞的遷移能力上有何影響,依照該影響請預期初期腫瘤患 者與晚期患者的腫瘤細胞中mTOR基因表達的高地情況。 </p><p> ?。?) 已知雷帕霉素為mTOR的抑制劑,請對加入雷帕霉素處理的細胞進行劃 痕實驗的結果進行預期,并試述原因。 </p><p
23、> 2. 細胞的分化是由于組織專一性的關鍵基因表達的結果。某人通過DNA array發(fā)現三個在肌肉分化中表達的基因。為了研究它們的功能,他分別做了基因剔除小鼠實驗,發(fā)現:①當A基因剔除時,小鼠肌肉特別發(fā)達;②當B基因剔除時,小鼠在胚胎肌肉發(fā)育前死亡;③當C基因剔除時,小鼠出生后三周開始肌肉萎縮,請根據以上結果分析,A、B、C三個基因在肌肉發(fā)育中的功能。 </p><p> 3. 細胞內的一些膜細
24、胞器,如內質網、高爾基體、溶酶體、內吞體等組成了一個動態(tài)的體系。將利用特異性抗體來標記不同的細胞器時,在熒光顯微鏡下發(fā)現除內質網在細胞質中呈現均勻分布外,其他幾種細胞器主要以大量囊泡狀結構集中在細胞核附近的一個區(qū)域。而且,這種集中方式在處于有絲分裂的細胞中看不到。問: </p><p> (1) 你推測這些聚集在一起的細胞器與胞內的什么結構相關?如何用實 驗來證明? </p><p>
25、; (2) 你認為它們?yōu)楹螘霈F這樣的組織方式?如何用實驗來證明? </p><p> ?。?) 你認為這種組織方式會有什么意義? </p><p><b> 答案</b></p><p> 一、名詞解釋(5題,每題6分,共30分} </p><p> 1. 端粒(Telomere): </p>
26、<p> 端粒是線狀染色體末端的DNA重復序列,是真核染色體兩臂末端由特 定的DNA重復序列構成的結構,使正常染色體端部間不發(fā)生融合,保證每條染色體的完整性。端粒有許多重要的生物學功能:穩(wěn)定染色體末端結構,防止染色體間末端連接,并可補償滯后鏈5'末端在消除RNA引物后造成的空缺,維持染色體的完整性和獨立性;端粒的長度與細胞及生物個體壽命相關等等。 【考查重點】第十章第四節(jié)一、中期染色體的形態(tài)結構 </p
27、><p> 2. 紡錘體組裝監(jiān)控點(Spindle assembly checkpoint):</p><p> 細胞有絲分裂過程中,紡錘體組裝檢 控點監(jiān)控著染色體在赤道板的隊列和向紡錘體兩極的分離,確保動粒-微管的黏附和有絲分裂器的完整,使所有的染色體都置于赤道板并雙極定向后才進入后期,保證遺傳物質均等地分配給兩個子代細胞。若紡錘體組裝完成,動粒全部被紡錘體微管捕捉,Mad2從動粒上消失
28、,解除對cdc20抑制,促使APC活化,降解M期周期蛋白,從而介導細胞周期從中期向后期推進。 【考查重點】第十二章第一節(jié)二、細胞周期中各個不同時相及其主要事件 </p><p> 3. 胚胎干細胞(embryonic stem cell):</p><p> 胚胎干細胞是早期胚胎(原腸胚期之前)或原始性 腺中分離出來的一類細胞,它具有體外培養(yǎng)無限增殖、自我更新和多向分化的特性。無論在
29、體外還是體內環(huán)境,ES細胞都能被誘導分化為機體幾乎所有的細胞類型。胚胎干細胞具有萬能分化性功能,特點是可以細胞分化成多種組織的能力,但無法獨自發(fā)育成一個個體。它可以轉化成為外胚層、中胚層及內胚層三種胚層的成員,然后再轉化成為人體的220多種細胞種類。 【考查重點】第十四章第一節(jié)二、影響細胞分化的因素 </p><p> 4. 粘著斑(Focal adhesion):</p><p>
30、 細胞外基質與一個細胞的肌動蛋白細胞骨架之間的物理聯系由 被稱為“粘著斑”(focal adhesion)的細胞器組成,它們通過“整聯蛋白”(或稱整合素)發(fā)揮作用。它們在人體生理中具有根本性的重要性,因為它們調控細胞粘附、機械傳感和控制細胞生長及分化的信號。現在,“粘著斑”的分子架構已通過利用三維超分辨率熒光顯微鏡在納米尺度上觀測蛋白組織方式而被確定。 【考查重點】第十五章第一節(jié)二、錨定連接</p><p>
31、 5. 細胞衰老(cell senescence):</p><p> 由于正常體細胞中DNA端粒長度隨復制次數增加而縮短, 以及氧化損傷等原因,使正常細胞經有限次數分裂后,停止分裂,細胞形態(tài)和生理代謝活動發(fā)生顯著改變。例如:①細胞內水分減少,體積變小,新陳代謝速度減慢;②細胞內酶的活性降低;③細胞內的色素會積累;④細胞內呼吸速度減慢,細胞核體積增大,核膜內折,染色質收縮,顏色加深。線粒體數量減少,體積增大;⑤
32、細胞膜通透性功能改變,使物質運輸功能降低等等。 【考查重點】第十三章第二節(jié)一、細胞衰老的概念及特征</p><p> 二、是非題(20題,每題1分,共20分。請將答案按題目序號寫在答題紙上,答“是”寫“V”,答“非”寫“X”) </p><p> 1. 氯霉素抑菌是因其可抑制原核70S核糖體肽酰轉移酶。 </p><p> 正確 【考查重點】第十一章第二
33、節(jié)二、蛋白質的合成 </p><p> 2. 線拉體通過ATP合成酶參與細胞凋亡。 </p><p> 錯誤 【答案解析】在細胞凋亡的內源途徑中,線粒體會向細胞質基質中釋放出凋亡相關因子,引發(fā)細胞凋亡。 【考查重點】第十三章 第一節(jié) 一、動物細胞的程序性死亡 </p><p> 3.前體rRNA甲基化的重要性在于防止前體rRNA被加工。 </p>
34、;<p> 錯誤 【答案解析】甲基化可能對rRNA的加工起到引導作用 【考查重點】第十一章 第一節(jié) 一、核糖體的基本類型與化學組成 </p><p> 4.催化三羧酸循環(huán)、脂肪酸和丙酮酸氧化等有關的主要酶類存在于線粒體的脊上。 </p><p> 錯誤 【答案解析】主要存在與線粒體基質上 【考查重點】第六章 第一節(jié) 一、線粒體的形態(tài)結構 </p>
35、<p> 5.在自然條件下,有遺傳效應的染色體交換發(fā)生在非同源染色體的姊妹染色體之間。 </p><p> 錯誤 【答案解析】染色體交換發(fā)生在同源染色體的非姊妹染色單體之間 【考查重點】第十二章 第二節(jié) 二、減數分裂 </p><p> 6.啤酒酵母的交配型轉變(Mating-type interconversion)機制屬于轉錄后水平調控。 </p>
36、<p> 正確 【考查重點】第十四章 第三節(jié)真核細胞基因表達的調控 </p><p> 7.哺乳類動物體內唯一能產生抗體免疫球蛋白分子的細胞是Tc細胞。 </p><p> 錯誤 【答案解析】哺乳動物體內能產生抗體的是效應B細胞和記憶B細胞,Tc細胞能消滅被感染的細胞 </p><p> 8.原核細胞的呼吸酶定位在類核區(qū)內。 </p
37、><p> 錯誤 【答案解析】原核細胞的呼吸酶定位在細胞質膜上 【考查重點】第二章 第二節(jié) 二、原核細胞的主要代表</p><p> 9. 真核細胞染色體的每個細胞周期中僅復制一次因為S期時間很短。 </p><p> 錯誤 【答案解析】DNA執(zhí)照假說指出,每個前DNA復制復合體只能行使一次功能 【考查重點】第十二章 第三節(jié) 五、細胞周期運轉調控 </
38、p><p> 10. In situ hybridization是將基因定位于染色體上的研究手段。 </p><p> 正確 【考查重點】第三章 第二節(jié) 四、細胞內特異核酸序列的定位與定性 </p><p> 11.瘤細胞通常由正常細胞轉化而來,與原來的細胞相比,癌細胞的分化程度通常表現為分化程度高。 </p><p> 錯誤 【答
39、案解析】癌細胞的分化程度低 【考查重點】第十四章 第二節(jié) 一、癌細胞的基本特征 </p><p> 12. 白細胞表面抗原CD45是一種受體酪氨酸磷酸脂酶。 </p><p> 正確 【考查重點】第八章 第四節(jié) 二、細胞表面其他酶聯受體 </p><p> 13.推動細胞周期由G2相向M相過渡的驅動器為CDK1。</p><p>
40、 正確 【考查重點】第十二章 第三節(jié) 五、細胞周期運轉調控 </p><p> 14. 細胞中具有催化功能的成份是蛋白質與核酸。 </p><p> 正確 【考查重點】第十一章 第一節(jié) 三、核糖體蛋白質與rRNA的功能 </p><p> 15. 與真核細胞相比,原核細胞在DNA復制、轉錄與翻譯上具有時空連續(xù)性的特點。 </p><p
41、> 正確 【考查重點】第十一章 第二節(jié) 一、多聚核糖體 </p><p> 16. 溶酶體在動物、植物、原生動物和細菌中均有存在。 </p><p> 錯誤 【答案解析】溶酶體只存在于真核生物中 【考查重點】第七章 第二節(jié) 三、溶酶體的形態(tài)結構與功能 </p><p> 17. 特異顯示DNA在細胞中分布的方法是PAS反應。 </p>
42、;<p> 錯誤 【答案解析】PAS法用于確定多糖的存在,而福爾根反應可以特定顯示DNA的分布 【考查重點】第三章 第二節(jié) 二、細胞內核酸、蛋白質、糖與脂質等成份的顯示方法 </p><p> 18.染色質纖維上非組蛋白的主要功能是調控基因表達。 </p><p> 正確 【考查重點】第十章 第二節(jié) 三、染色質蛋白 </p><p> 19
43、. 突變后的Ras蛋白不能結合GTP,從而使Ras蛋白維持于活化狀態(tài),不斷激活靶分子,導致細胞大量增殖,而發(fā)生惡性轉化。 </p><p> 錯誤 【答案解析】突變的ras能夠與GTP結合,但不能將其水解為GDP,使其鎖定在開啟狀態(tài),引起贅生性細胞增生。 【考查重點】第八章 第四節(jié) 一、受體酪氨酸激酶及RTK-Ras蛋白信號通路 </p><p> 20. 冰凍蝕刻技術主要用于隧道
44、顯微鏡。 </p><p> 錯誤 【答案解析】冰凍蝕刻技術主要與電鏡相結合,將形成的碳膜在電鏡上觀察</p><p> 【考查重點】第三章 第一節(jié) 二、電子顯微鏡技術 </p><p> 三、選擇題〈每題可能多個答案,多遠或漏選皆不得分;15題,每題2分,共30分〉 </p><p> 1. 流式細胞術可用于測定: <
45、;/p><p> A、細胞的大小和特定細胞類群的數量</p><p> B、分選出特定的細胞類群 </p><p> C、細胞中DNA、RNA或某種蛋白的含量 </p><p> D、以上三種功能都有 </p><p> D 【考查重點】第三章 第二節(jié) 六、定量細胞化學分析技術 </p&g
46、t;<p> 2. 在粗面內質網上合成的蛋白質包括: </p><p> A、線粒體中的蛋白質</p><p><b> B、分泌蛋白 </b></p><p> C、膜蛋白 </p><p> D、溶酶體中的蛋白 </p><p> ABCD【考查重點】第
47、七章 第二節(jié) 一、內質網的形態(tài)結構與功能 </p><p> 3. 能抑制CDK活性的酶是: </p><p> A、Weel B、CAK C、cdc25 D、p21 </p><p> AD【考查重點】第十二章 第三節(jié) 四、CDK激酶和CDK激酶抑制物 </p><p&
48、gt; 4. 所有膜蛋白都具有方向性,其方向性在什么部位中確定: </p><p> A、細胞質基質 B、高爾基體 C、內質網 D、質膜 </p><p> C【考查重點】第七章 第二節(jié) 一、內質網的形態(tài)結構與功能 </p><p> 5. 屬于蛋白酪氨酸激酶類型的受體是: </p><p&
49、gt; A、EGF受體 B、PDGF受體 C、TGFβ受體 D、IGF-1受體 </p><p> ABD【考查重點】第八章 第四節(jié)一、受體酪氨酸激酶及RTK-Ras蛋白信號通路 </p><p> 6. 下列技術中能用于研究膜蛋白流動性的方法是:</p><p> A、熒光抗體免疫標記B、熒光能量共振轉移 C、光脫色
50、熒光恢復D、熒光標記細胞融合 ACD【考查重點】第三章 第一、二節(jié) </p><p> 7. 中心粒和鞭毛的基粒: </p><p><b> A、都是9+2結構</b></p><p> B、前者是9+2結構,后者是9+0結構 </p><p><b> C、都是9+0結構</b>
51、</p><p> D、前者是9+0結構,后者是9+2結構 </p><p> C【考查重點】第九章 第二節(jié) 八、纖毛和鞭毛的結構與功能 </p><p> 8. 下列結構中屬于細胞膜上的結構有: </p><p> A、內吞小泡 B、有被小窩 C、脂質筏 D、微囊 </p>&
52、lt;p> ABC【考查重點】第四、五章 </p><p> 9. 纈氨霉素是一種可動離子載體,運輸:</p><p> A、Na+B、K+C、Ca2+D、Mg2+ </p><p> B【考查重點】第五章 </p><p> 10. 線粒體參與細胞凋亡通過: </p><p> A、釋放細胞
53、色素C B、釋放Ach E C、合成酶ATP D、SOD </p><p> A【考查重點】第十三章 第一節(jié) 一、動物細胞的程序性死亡 </p><p> 11. 關于第一次減數分裂下列觀點中哪些是錯誤的? </p><p> A、同源染色體不分裂 B、著色粒不分裂 C、染色單體分離D、不出現交叉 &l
54、t;/p><p> ACD【考查重點】第十二章 第二節(jié) 二、減數分裂 </p><p> 12. 關于核孔復合體正確的論述有: </p><p> A、有核定位信號的蛋白進入細胞核不需要核孔復合體 </p><p> B、介導蛋白質入核轉運,介導RNA、核糖核蛋白顆粒出核轉運 </p><p> C、核蛋白通
55、過核孔復合體由細胞質轉運到核內需要能量 </p><p> D、生物分子通過被動擴散和主動運輸進出核孔復合體 </p><p> CD【考查重點】第十章 第一節(jié) 二、核孔復合體 </p><p> 13. 內質網中含有的可以識別不正確折疊的蛋白并促使其重新折疊:</p><p> A、Bip蛋白B、Sec61蛋白 C、鈣結合蛋
56、白D、蛋白二硫鍵異構酶 </p><p> AD【考查重點】第七章 第二節(jié) 一、內質網的形態(tài)結構與功能 </p><p> 14. 存在于真核細胞的細胞膜上質子泵是: </p><p> A、P型質子泵 B、V型質子泵 C、H+-ATP酶 D、三種都有 </p><p> A【考查重點】第五
57、章 第二節(jié) </p><p> 15. 活性染色質具有如下哪些特性: </p><p><b> A、甲基化程度高</b></p><p> B、H2B的低磷酸化 </p><p> C、很少有組蛋白H1與其結合</p><p> D、組蛋白乙?;潭雀?</p>&
58、lt;p> BCD【考查重點】第十章 第三節(jié) 一、活性染色質與非活性染色質 </p><p> 四、問答題(4題,每題10分, 共40分〉 </p><p> 1. 試述膜流動性的生物學意義。 </p><p> 【答案解析】 生物膜的流動性是指膜脂與膜蛋白處于不斷的運動狀態(tài),它是保證正常膜功能的重要條件。在生理狀態(tài)下,生物膜既不是晶態(tài)
59、,也不是液態(tài),而是液晶態(tài),即介于晶態(tài)與液態(tài)之間的過渡狀態(tài)。在這種狀態(tài)下,其既具有液態(tài)分子的流動性,又具有固態(tài)分子的有序排列。當溫度下降至某一點時,液晶態(tài)轉變?yōu)榫B(tài);若溫度上升,則晶態(tài)又可溶解為液晶態(tài)。這種狀態(tài)的相互轉化稱為相變,引起相變的溫度稱相變溫度。在相變溫度以上,液晶態(tài)的膜脂總是處于可流動狀態(tài)。膜脂分子有以下幾種運動方式:①側向移動;②旋轉運動;③左右擺動;④翻轉運動。膜蛋白分子的運動形式有側向運動和旋轉運動二種。 生物膜的流動
60、性有利于物質運輸和交換,比如礦質離子的主動運輸,內吞外排作用等等;有助于能量流動和信息傳遞;有助于自我修復;還有它是細胞融合技術的基礎。 </p><p> 【考查重點】第四章第二節(jié)一、膜的流動性 </p><p> 2. 請根據溶酶體的形成過程,說明溶酶體不同階段及其功能的特點。 </p><p> 【答案解析】 溶酶體是動物細胞中的一種膜結合細
61、胞器,含有多種水解酶類,在細胞內起消化和保護作用,在與吞噬泡或者胞飲泡結合,消化和利用其中的物質。溶酶體的發(fā)生過程:溶酶體酶是在粗面內質網上合成并經過N-鏈接的糖基化修飾,然后轉至高爾基體,在高爾基體順面膜囊中寡糖鏈上的甘露糖殘基發(fā)生磷酸化形成M6P,在高爾基體反面膜囊和TNG膜囊上存在M6P受體,這樣溶酶體的酶與其他蛋白區(qū)分開,并得以濃縮,最后以出芽的形式轉運至溶酶體中。 溶酶體是一種多樣性和異質性的細胞器,根據溶酶體所處生理功能的
62、不同階段,可以區(qū)分為:1.初級溶酶體,內容物均一,含有許多水解酶類,包括蛋白酶、核酸酶、糖苷酶等;2.次級溶酶體,是初級溶酶體與細胞內的自噬泡、胞飲泡、吞噬泡融合形成的復合體;3.殘余小體,這些小體已經失去酶,僅剩下未消化的殘渣,又叫殘體。 溶酶體的功能:防御供能;作為細胞內的消化器官為細胞提供營養(yǎng);在分泌細胞中,溶酶體常常含有攝入的分泌顆粒,參與分泌過程的調節(jié);兩類發(fā)育過程中蝌蚪尾巴的退化,哺乳動物斷奶后乳腺的退行性變化等都涉及某些
63、特定細胞編程性死亡及周圍活細胞對其的清除,這些過程都與溶酶體有關;在受精</p><p> 3. 請說明免疫熒光細胞化學中熒光抗體示蹤(免疫熒光細胞化學)的技術原理、方法與實驗步驟及其在細胞生物學研究中的應用。 </p><p> 【答案解析】 技術原理:免疫熒光細胞化學是根據抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光素制成熒光標記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作為分子探針
64、檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。在細胞或組織中形成的抗原抗體復合物上含有熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標本,熒光素受激發(fā)光的照射而發(fā)出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看見熒光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質、定位,以及利用定量技術測定含量。 </p><p> 方法:免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發(fā)生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另
65、一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應</p><p> 實驗步驟:1.細胞爬片;2.4%多聚甲醛固定10分鐘(固定細胞器用預冷的70%甲醇+30%丙酮);3.PBS漂洗;4.0.5%Triton通透穿孔;5.PBS漂洗 6.1%BSA封閉;7. 加入1%BSA稀釋的一抗,于37度雜交;8.PBS漂洗;
66、9.加入1%BSA稀釋的二抗,于37度雜交;10.PBS漂洗;11.5μg/mlDAPI染色;12.抗猝滅封片劑封片13. 觀察。 </p><p> 應用:免疫細胞化學技術與親和化學技術如葡萄球菌A蛋白、生物素、與卵白素、植物血凝素相結合拓寬了領域;與激光技術、電子計算機和掃描電鏡等技術結合發(fā)展為定量免疫熒光細胞化學技術;熒光激活細胞分類器(FACS)的應用是免疫熒光細胞化學技術發(fā)展到更高的階段,開創(chuàng)了免疫
67、熒光技術的新領域。細胞顯微分光光度計與圖像分析儀的結合使免疫熒光組織化學的定量檢測更加準確。在免疫熒光細胞化學中應用單克隆抗體日益增多,將會不斷提高特異性、敏感性和應用范圍。激光掃描等聚焦顯微鏡的應用又開創(chuàng)了新的發(fā)展時代。由于免疫熒光細胞化學的特異性、快速性和在細胞和分子水平定位的敏感性與準確性,在免疫學、微生物學、細胞和組織學、病理學、腫瘤學、以及臨床檢驗學等生物學和醫(yī)學許多方面得到廣泛應用,日益發(fā)揮重要作用。 </p>
68、<p> 【考查重點】第三章第二節(jié)三、特異蛋白抗原的定位與定性(對一些在生物學研究領域應用較為廣泛的實驗技術的整體把握) </p><p> 4. 2012年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎授予英國發(fā)育生物學家約翰、戈登(John Gurdon)與日本京都大學教授山中伸彌(Shinya Yamanaka )。兩位科學家取得的成果都與誘導多功能干細胞(iPS)相關。試論述iPS的在生物醫(yī)學科學領域中的理
69、論與實踐意義。 </p><p> 【答案解析】 誘導多能干細胞(induced pluripotent stem cells iPS):2006年日本京都大學Shinya Yamanaka在世界著名學術雜志《細胞》上率先報道了誘導多能干細胞的研究。他們把Oct3/4,Sox2、c-Myc和Klf4這四種轉錄因子基因克隆入病毒載體,然后引入小鼠成纖維細胞,發(fā)現可誘導其發(fā)生轉化,產生的iPS細胞在形態(tài)、基因
70、和蛋白表達、表觀遺傳修飾狀態(tài)、細胞倍增能力、類胚體和畸形瘤生成能力、分化能力等方面都與胚胎干細胞相似。 iPS細胞的出現,在干細胞研究領域、表觀遺傳學研究領域以及生物醫(yī)學研究領域都引起了強烈的反響,這不僅是因為它在基礎研究方面的重要性,更是因為它為人們帶來的光明的應用前景。在基礎研究方面,它的出現,已經讓人們對多能性的調控機制有了突破性的新認識細胞重編程是一個復雜的過程,除了受細胞內因子調控外,還受到細胞外信號通路的調控。對于Oct4
71、、Sox2和Nanog等維持于細胞自我新能力的轉錄因子的研究正在逐漸地展開;利用iPS細胞作為實驗模型,只操縱幾個因子的表達,這更會大大加速對多能性調控機理的深入研究。在實際應用方面,i</p><p> 【考查重點】第十四章 ( 需要關注近年來的諾貝爾獎與細胞生物學有關的技術、原理與方法 )</p><p> 五、實驗與分析題(3題, 每題10分,共30分〉 </p>
72、;<p> 1. 細胞劃痕實驗是指將細胞培養(yǎng)在培養(yǎng)皿或平板上,待細胞融合后用細胞刮在中央區(qū)域畫一條線,這條線內的細胞被機械力去除掉了,然后將細胞繼續(xù)培養(yǎng),觀察細胞向無細胞的劃痕區(qū)域遷移的情況,來判斷細胞的遷移能力。某課題組,為研究mTOR基因對腫瘤遷移能力的影響,以敲減細胞中mTOR基因為實驗組,對照正常細胞進行劃痕實驗,結果如下圖: 依據上述信息后,請作答: </p><p> ?。?)
73、 何為基因敲減(gene knock-down)? </p><p> ?。?) mTOR在腫瘤細胞的遷移能力上有何影響,依照該影響請預期初期腫瘤患 者與晚期患者的腫瘤細胞中mTOR基因表達的高地情況。 </p><p> ?。?) 已知雷帕霉素為mTOR的抑制劑,請對加入雷帕霉素處理的細胞進行劃 痕實驗的結果進行預期,并試述原因。 </p><p> 【
74、答案解析】 (1)基因敲減,即基因敲除,就是通過同源重組將外源基因定點整合入靶細胞基因組上某一確定的位點,以達到定點修飾改造染色體上某一基因的目的的一種技術。此法可產生精確的基因突變,也可正確糾正機體的基因突變。 </p><p> ?。?)從圖中可以看出,當敲減mTOR基因48小時之后,實驗組相對與對照組,腫瘤細胞遷移能力明顯降低,這說明mTOR基因能否促進腫瘤的遷移。由于腫瘤轉移能力的是惡性腫瘤相對于良性
75、腫瘤的最重要的特征,因此可以初步推斷初期腫瘤患者mTOR表達量低于晚期腫瘤患者。 </p><p> ?。?)由于雷帕霉素為mTOR抑制劑,因此當給兩組同時加入雷帕霉素,4小時之后觀察,可能會看到對照組腫瘤細胞由于受到抑制遷移數目大量減少,而實驗組由于敲除mTOR基因,抑制劑對其作用不大,因此對照組細胞遷移數目接近于實驗組。 </p><p> 【考查重點】需要把握有關基因敲減技術的原
76、理與應用方法,并且要有能夠善于分析實驗現象、解決實驗問題的能力 </p><p> 2. 細胞的分化是由于組織專一性的關鍵基因表達的結果。某人通過DNA array發(fā)現三個在肌肉分化中表達的基因。為了研究它們的功能,他分別做了基因剔除小鼠實驗,發(fā)現:①當A基因剔除時,小鼠肌肉特別發(fā)達;②當B基因剔除時,小鼠在胚胎肌肉發(fā)育前死亡;③當C基因剔除時,小鼠出生后三周開始肌肉萎縮,請根據以上結果分析,A、B、C三個基
77、因在肌肉發(fā)育中的功能。 </p><p> 【答案解析】 在肌細胞,由于肌動蛋白纖維組成的微絲參與形成肌原纖維的細肌絲和肌肉收縮。 A基因為微絲抑制蛋白的基因,對微絲起到負調控作用; B基因為控制微絲分化的基因,缺少B基因微絲無法形成; C基因為控制微絲代謝的基因,缺少C基因微絲代謝不正常,肌肉萎縮。 </p><p> 【考查重點】第十四章(基因與功能的相關性,存在特定的
78、基因就會發(fā)揮特定的功能,當剔除相關的基因當然就會損失該基因有關功能,本題只需要逆向思考以上三例是哪三個基因的剔除而造成其功能缺失的現象) </p><p> 3. 細胞內的一些膜細胞器,如內質網、高爾基體、溶酶體、內吞體等組成了一個動態(tài)的體系。將利用特異性抗體來標記不同的細胞器時,在熒光顯微鏡下發(fā)現除內質網在細胞質中呈現均勻分布外,其他幾種細胞器主要以大量囊泡狀結構集中在細胞核附近的一個區(qū)域。而且,這種集
79、中方式在處于有絲分裂的細胞中看不到。問: </p><p> ?。?) 你推測這些聚集在一起的細胞器與胞內的什么結構相關?如何用實 驗來證明? </p><p> ?。?) 你認為它們?yōu)楹螘霈F這樣的組織方式?如何用實驗來證明? </p><p> ?。?) 你認為這種組織方式會有什么意義? </p><p> 【答案解析】 已知
80、高爾基體分布在微管的負極區(qū),而且有絲分裂過程中染色體的行為依賴于微管的動態(tài)組裝和去組裝,在有絲分裂過程中看不到,說明細胞器的分布位置與細胞骨架有關,因此可推測:(1)細胞器聚集于細胞骨架組織有關。用特異性藥物處理,例如秋水仙素,使細胞骨架部分崩解,如果細胞器分散而不能聚集,則可以證明細胞器與細胞骨架有關。 (2)這些細胞器的聚集有利于物質信息能量的有效迅速的傳遞。實驗證明:用特異性藥去處理實驗組,使其骨架破壞但能正常生活,比較它們與正
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