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1、本研究以擬除蟲(chóng)菊酯類殺蟲(chóng)劑氯氰菊酯為研究對(duì)象,對(duì)氯氰菊酯的高效液相色譜測(cè)定方法,氯氰菊酯降解真菌的富集分離,降解真菌的降解特性,氯氰菊酯農(nóng)藥降解酶的提取及降解酶的降解特性進(jìn)行了比較系統(tǒng)的研究。主要內(nèi)容如下:
1、建立了環(huán)境中氯氰菊酯殘留的分析方法-高效液相色譜法。水體中氯氰菊酯的提取采用旋渦振蕩提取法,提取溶劑為石油醚;氯氰菊酯的測(cè)定采用高效液相色譜法,條件為:HPLC:HP-1100型,色譜柱:C18柱(4.6×250
2、mm),柱溫:35℃,檢測(cè)器:DAD,檢測(cè)波長(zhǎng):235nm,流動(dòng)相:V乙腈:V水=80:20,流速:1 mL·min-1,進(jìn)樣量:10μL。該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、分離度高,在此條件下氯氰菊酯的保留時(shí)間分別為3.641 min和3.881 min。液體培養(yǎng)基中氯氰菊酯的添加量分別為1、10、50、100 mg·L-1,平均添加回收率為86.68%~102.25%,測(cè)定結(jié)果的變異系數(shù)為1.32%~2.85%。
2、采用富集培養(yǎng)的方
3、法篩選氯氰菊酯高效降解真菌。分離篩選得到三株以氯氰菊酯為唯一碳源生長(zhǎng)的真菌,編號(hào)為TS-203、TS-205和TS-306;經(jīng)過(guò)初步鑒定,三株真菌分別屬于鐮孢霉屬(Fusarium)、毛鏈孢屬(Monilochaetes)和土生曲霉組(Aspergillus terreus)。該三株菌5 d內(nèi)對(duì)100mg·L-1氯氰菊酯降解率分別高達(dá)94.5%、91.4%和84.5%。
3、分別研究了不同外加碳源濃度、pH、培養(yǎng)溫度及氯氰
4、菊酯濃度對(duì)真菌生長(zhǎng)量和降解能力的影響。結(jié)果表明,以氯氰菊酯為唯一碳源且濃度為50~150 mg·L-1,pH為6.0~8.0,培養(yǎng)溫度為30~40℃時(shí),真菌的生長(zhǎng)量較大,降解效果較好。
4、對(duì)高效降解真菌TS-203的降解酶進(jìn)行了研究。對(duì)降解菌的胞內(nèi)酶和胞外酶的降解活性進(jìn)行了測(cè)定,結(jié)果表明,其胞內(nèi)酶對(duì)氯氰菊酯的降解率高達(dá)59.8%,而由(NH4)2SO4沉淀提取到的胞外酶液對(duì)氯氰菊酯的降解率僅為10.3%,由此確定該降解菌
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