山西省華北落葉松天然種群遺傳多樣性的AFLP分析.pdf

1、華北落葉松（Larix principis-rupprechtii Mayr.）是我國(guó)華北地區(qū)寒溫性針葉林中的主要樹(shù)種之一。其天然林主要分布在河北和山西兩省，具有改良土壤，涵養(yǎng)水源等作用。本研究以山西省的6個(gè)華北落葉松天然種群為研究對(duì)象，采用AFLP分子標(biāo)記技術(shù)，對(duì)其遺傳多樣性和空間遺傳結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行研究。主要研究結(jié)果如下:
　　1)建立了華北落葉松AFLP反應(yīng)體系和程序，并優(yōu)化了影響AFLP反應(yīng)的5個(gè)主要因素（酶切時(shí)間、內(nèi)切酶用量

2、、DNA用量、連接產(chǎn)物和預(yù)擴(kuò)增產(chǎn)物的稀釋倍數(shù)），即在反應(yīng)體系均為20μL的條件下，酶切時(shí)間為7h(37℃3.5h;65℃3.5h)，EcoRⅠ內(nèi)切酶和MseⅠ內(nèi)切酶用量均為1U，DNA用量為3μL（50ng/μL），連接產(chǎn)物稀釋10倍取5μL用于預(yù)擴(kuò)增，預(yù)擴(kuò)增產(chǎn)物稀釋70倍取4μL用于選擇性擴(kuò)增。
　　2)用篩選出的8對(duì)引物組合對(duì)6個(gè)華北落葉松天然種群的144個(gè)個(gè)體進(jìn)行AFLP分析，共擴(kuò)增出402條譜帶，其中289條為多態(tài)性帶，多

3、態(tài)性帶占71.89％。恒山張家洼種群(HS)的多態(tài)位點(diǎn)百分率和遺傳多樣性指數(shù)最高（PPB=55.97％，h=0.2065，I=0.3047）;關(guān)帝山龐泉溝種群(GD)的多態(tài)位點(diǎn)百分率和遺傳多樣性指數(shù)最低(PPB=44.53％, h=0.1519, I=0.2284)。
　　3)華北落葉松總基因多樣性(Ht)為0.2245，種群內(nèi)基因多樣性（Hs）為0.1810。遺傳分化系數(shù)(Gst)為0.1936，表明在總的遺傳變異中有19.36

4、％的變異存在于種群間，80.64％的變異存在于種群內(nèi)，說(shuō)明華北落葉松的遺傳變異主要存在于種群內(nèi)，且種群內(nèi)個(gè)體間的遺傳分化程度較高。基因流(Nm)為2.0821，表明種群間基因交流較頻繁。
　　4)6個(gè)華北落葉松種群間遺傳一致度(I)在0.9269-0.9677之間，平均為0.9409;遺傳距離(D)在0.0328-0.0759之間，平均為0.0610。表明這6個(gè)華北落葉松天然種群間的親緣關(guān)系很近，但又不是完全一致，各種群間存在著一

5、定的遺傳變異。其中關(guān)帝山龐泉溝種群(GD)和蘆芽山荷葉坪種群(LY)的親緣關(guān)系最近(I=0.9677;D=0.0328)，而六棱山樺林背種群(LL)和恒山張家洼種群(HS)的親緣關(guān)系最遠(yuǎn)(I=0.9269;D=0.0759)。用UPGMA法進(jìn)行聚類分析，可將6個(gè)種群分為三組:五臺(tái)山茂材林種群(WT)和六棱山樺林背種群(LL)為一組;蘆芽山荷葉坪種群(LY)和關(guān)帝山龐泉溝種群(GD)為一組;恒山張家洼種群(HS)和太岳山好地方種群(TY)