水稻白葉枯病菌和細菌性條斑病菌對噻枯唑和鏈霉素的抗藥性監(jiān)測及室內(nèi)抗藥性風險評估.pdf

1、水稻白葉枯病和細菌性條斑病是水稻上重要的細菌性病害，嚴重危害水稻的生長和品質(zhì)。應用藥劑防治是最經(jīng)濟有效的應急方法，噻枯唑和鏈霉素是目前用來防治水稻細菌性病害的主要藥劑，病原菌抗藥性問題將直接關(guān)系到對這兩種細菌病害控制的有效性。本研究在溫室采用活體寄主測定法，監(jiān)測了來自我國水稻主產(chǎn)區(qū)的白葉枯病菌對噻枯唑的抗藥性，結(jié)果表明，其抗藥性頻率較高。在室內(nèi)采用區(qū)分計量法，監(jiān)測了水稻白葉枯病菌和細菌性條斑病菌對鏈霉素的抗藥性，并以對鏈霉素敏感的水稻細

2、菌性條斑病菌為出發(fā)菌株，通過紫外光誘導和藥劑馴化得到抗鏈霉素的突變體；比較了出發(fā)菌株和突變體對藥劑的敏感性(MIC、EC50)和致病力等生物學特性，評估了室內(nèi)抗藥性風險。結(jié)果表明，突變體抗藥性穩(wěn)定，致病力與出發(fā)菌株相比沒有明顯差異，預示田間自然情況下抗藥性菌株可能為藥劑防治帶來潛在風險。
　　 2007-2009年，采用活體寄主測定法，對來自云南、江蘇、安徽、湖北、廣東、海南、湖南七省的水稻白葉枯病菌，測定其對噻枯唑的抗藥性。本

3、研究共監(jiān)測了505株水稻白葉枯病菌，依據(jù)300μg/ml噻枯唑?qū)μ镩g分離菌株的相對抑制率分布頻率確定了水稻白葉枯病菌對噻枯唑抗藥性菌株和敏感菌株的判斷標準：300μg/ml噻枯唑處理下，所測菌株致病的抑制率低于參照菌株ZJ173抑制率的70％時，該菌株為抗藥性菌株。依據(jù)此抗、感區(qū)分標準，共監(jiān)測到62株抗藥性菌株，抗藥性菌株在群體中總的頻率為12.28％。其中2007-2009年水稻白葉枯病菌對噻枯唑具有抗藥性的菌株出現(xiàn)頻率分別為11.2

4、1％，20.00％,10.42％。選取7株抗藥性菌株和3株敏感菌株，測定了噻枯唑在離體條件下抑制其生長的EC50值，對敏感菌株的EC50為2.04-3.43μg/ml（平均值為2.51μg/ml），而對抗性菌株的EC50僅為1.95-3.49μg/ml(平均值為2.78μg/ml)。實驗結(jié)果表明，田間抗藥性菌株和敏感性菌株在離體條件下，對噻枯唑的敏感性無顯著性差異。
　　 采用區(qū)分劑量法，測定了水稻白葉枯病菌和細菌性條斑病菌對鏈

5、霉素的抗藥性。2008年測定來自云南、四川、江蘇、安徽、湖南等省的水稻白葉枯病菌148株和水稻細菌性條斑病菌344株，2009年來自江蘇、廣東等省的水稻白葉枯病菌96株和水稻細菌性條斑病菌43株，未監(jiān)測到對鏈霉素抗性的菌株。只有2007年在來自云南的102個菌株中監(jiān)測到4株水稻白葉枯病菌對鏈霉素表現(xiàn)抗藥性。監(jiān)測結(jié)果表明，水稻白葉枯病菌和細菌性條斑病菌目前在自然界對鏈霉素的抗性頻率還很低，采用常規(guī)生測方法難以檢測。
　　 選擇了4

6、個野生敏感菌株，分別通過紫外光誘導和藥劑馴服獲得了水稻細菌性條斑病菌抗鏈霉素突變體。對敏感菌株和突變體的最低抑制濃度(minimal inhibitionconcentration,MIC)、EC50值、交互抗性和致病力等方面的比較。鏈霉素對水稻細菌性條斑病菌野生敏感型菌株的MIC均小于1.6μg/ml，而抗藥突變體的MIC都大于800μg/ml，抗藥性水平近500倍。以敏感菌株RS105為例，其EC50值為0.20μg/ml，而4個抗