竹黃及其分離真菌的遺傳多樣性分析.pdf

1、竹黃(Shiraia bambusicola P.Henn.)是我國一種稀有的寄生性藥用真菌,具有極大的藥用價值,隨著竹黃中具有光敏活性的竹紅菌素(竹紅菌甲素和竹紅菌乙素)的發(fā)現(xiàn),竹黃的應用研究日益受到重視。
　　 為了了解竹黃地理居群間的遺傳分化,采用ISSR分子標記對江蘇、安徽和浙江3省的8個居群共107個竹黃樣本進行了遺傳多樣性的分析。本研究首先探討了Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物和模板DNA等5個因素對

2、ISSR-PCR擴增的影響,通過單因子試驗和正交設計方法相結合建立并優(yōu)化了竹黃ISSR-PCR反應體系。采用優(yōu)化好的體系,對來自江蘇、安徽、浙江三省的8個自然居群共107個竹黃樣本進行遺傳多樣性和遺傳結構的分析。結果表明,篩選得到的11條引物共檢測出241個位點,其中多態(tài)性位點240個,占99.59％,居群水平的多態(tài)位點百分率平均為64.21％,其中以浙江天目山為最高(74.27％),江蘇宜興為最低(45.23％)。Nei’s基因多樣性

3、指數(shù)、Shannon多態(tài)性信息指數(shù)分別為0.3314和0.4996,表明竹黃的遺傳多樣性較高。居群Nei’s基因分化系數(shù)Gst為0.3314,居群內產生了較大的遺傳分化。AMOVA分析表明,居群間變異占39.96％,居群內變異占60.04％,遺傳變異主要存在于居群內。8個居群間的遺傳距離變化范圍在0.1115～&2453之間,平均為0.1766。居群間的基因流Nm=1.0086,說明居群間存在一定的基因交流。UPGMA聚類分析以及主坐標

4、分析結果顯示,地理上距離較近的居群多聚在一起,表現(xiàn)出一定的地域性,說明各居群的親緣關系與地理分布有著密切關系。
　　 為了鑒定竹黃子實體的相關菌,本研究從江蘇宜興、安徽廣德以及浙江的安吉和麗水采集的竹黃子實體上分離純化得到了36株真菌,對它們進行ITS-rDNA序列的系統(tǒng)學分析,利用鄰接法和最大簡約法分別對這36株菌的ITS序列和其它15條來自GenBank的相關序列進行了分析,結果表明這些真菌中29株屬于子囊菌,3株屬于擔子菌