中草藥輪葉黨參再生體系的建立.pdf

1、分別以輪葉黨參（Codonopsis lanceolata Benth.et Hook.）的葉片、葉柄、莖段、種子和帶腋芽莖段為外植體，通過愈傷組織的誘導(dǎo)及分化和叢生芽的誘導(dǎo)，建立了兩種再生體系，獲得的主要結(jié)果如下：
　　 1.愈傷組織誘導(dǎo)：以種子、莖段、葉片和葉柄為外植體均能誘導(dǎo)出愈傷組織，但在出愈率和愈傷生長方面差異較大，其中葉片誘導(dǎo)愈傷組織效果最好，是比較理想的外植體。不同激素組合對愈傷組織的形成影響很大，其中生長素2，4

2、-D是愈傷組織形成的關(guān)鍵因素。篩選出最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：MS+2，4-D0.5mg.L-1+6-BA1.0mg.L-1+KT0.5mg.L-1，出愈率達(dá)100％。
　　 2.愈傷組織繼代培養(yǎng)：不同光照條件下愈傷組織均可增殖，但是光照16h.d-1條件下，愈傷增殖倍數(shù)最高，達(dá)9.5，愈傷組織生長迅速，呈淡黃綠色，質(zhì)地緊密，這種繼代培養(yǎng)的愈傷組織在后期的分化過程中分化程度較高。篩選出最佳繼代培養(yǎng)基為MS+6-BA0.75mg.L-1+

3、NAA0.5mg.L-1。
　　 3.愈傷組織分化成苗：將生長較好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上，愈傷組織逐漸變綠，并形成很多突起，進(jìn)而形成多芽體。不同的光照條件對再生苗的分化影響顯著，16h.d-1條件下獲得的再生苗健壯，葉片多，而8h.d-1條件下獲得的再生苗瘦弱不宜馴化。篩選出最佳分化培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA0.5mg.L-1+NAA0.2mg.L-1，分化率高達(dá)89.4％。
　　 4.再生苗生根：再生苗接種到生

4、根培養(yǎng)基上15d后開始生根，45d生根趨于穩(wěn)定。在6號培養(yǎng)基上，試管苗根數(shù)可達(dá)26.8條，根長可達(dá)6.13cm。最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+LAA0.2mg.L-1+NAA0.2mg.L-1，生根率達(dá)92.7％。
　　 5.誘導(dǎo)叢生芽建立再生體系：以帶腋芽莖段為外植體可以誘導(dǎo)出芽苗，誘導(dǎo)芽苗的最佳培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA2.0mg.L-1+NAA1.0mg.L-1，誘導(dǎo)率最高為55.7％；MS+6-BA0.5mg.L-1+N