山東省土壤中土霉菌資源分類研究.pdf

1、木霉屬真菌常見于土壤中，是土壤微生物群系的重要組成部分，除個別為弱病原菌外，大多數(shù)對植物病原菌具有拮抗作用。木霉菌具有廣泛適應(yīng)性，廣譜性和多機制性等優(yōu)點，由于其產(chǎn)生纖維素酶、幾丁質(zhì)酶、蛋白酶等水解酶和抗生素而具有重要的經(jīng)濟價值。分析土壤中木霉的多樣性，能夠為開發(fā)多功能木霉資源，拓寬木霉的應(yīng)用領(lǐng)域，有效利用木霉防治植物病原菌，提供堅實的理論基礎(chǔ)，并且有可能發(fā)現(xiàn)新種或能應(yīng)用于多功能菌劑開發(fā)的木霉菌株。
　　 本實驗為明確山東省土壤中

2、木霉菌的種類資源，從山東省十七地市不同環(huán)境條件中采集到108份土壤樣品，用改良的孟加拉紅培養(yǎng)基從其中分離純化出244株木霉菌株。對以上244株木霉菌株進行了形態(tài)學(xué)鑒定，根據(jù)形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果從中挑選出61株典型木霉菌株進行ITS/5.8S分子生物學(xué)鑒定。結(jié)合形態(tài)學(xué)鑒定和ITS序列分析的結(jié)果，將分離到木霉菌分為8個種:哈茨木霉（Trichodermaharzianum）、棘孢木霉（Trichodermaasperellum）、短密木霉（Tri

3、chodermabrevicompactum）、深綠木霉（Trichodermaatrotiviride）、黃綠木霉（Trichodermaaureoviride）、粘綠木霉（Trichodermavirens）、橘綠木霉（Trichodermacitrinoviride）、長枝木霉（Trichodermalongibrachiatum）。其中短密木霉首次在我國土壤中發(fā)現(xiàn)，是我國木霉屬真菌的新紀(jì)錄種，豐富了我國的木霉菌資源。
　　

4、 哈茨木霉61株，占分離總數(shù)的25.0％，山東省大部分地區(qū)都有分布;黃綠木霉17株，占分離總數(shù)的7.0％，在臨沂、煙臺等八地市分離到;長枝木霉8株，占分離總數(shù)的3.3％，僅在煙臺萊州、淄博沂源、聊城莘縣、濱州陽信、沾化的土樣中分離到;粘綠木霉19株，占分離總數(shù)的7.8％，在煙臺、青島等六地市分離到;深綠木霉75株，占分離總數(shù)的30.7％，山東省大部分地區(qū)都有分布;棘孢木霉37株，占分離總數(shù)的15.2％，在煙臺、青島等八地市分離到;短密

5、木霉1株，占分離總數(shù)的0.4％，僅在聊城陽谷的土樣中分離到;橘綠木霉26株，占分離總數(shù)的10.7％，在臨沂、煙臺等八地市分離到。深綠木霉和哈茨木霉出現(xiàn)頻率最高，分別是30.7％、25.0％，是山東省土壤中的木霉菌優(yōu)勢種群。
　　 為進一步明確木霉菌的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系，用分子進化遺傳分析軟件MEGA4.1對61株已測木霉菌株進行了系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析。系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析結(jié)果顯示，系統(tǒng)發(fā)育分析能夠?qū)⒄尘G木霉(T.virens)、短密木霉（T.br

6、evicompactum）、長枝木霉（T.longibrachiatum）、棘孢木霉（T.asperellum）和深綠木霉（T.atroviride）、橘綠木霉（T.citrinovide）很好的聚類，但是不能將哈茨木霉（T.harzianum）、黃綠木霉（T.aureoviride）2個木霉種很好的聚類。
　　 將系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果、形態(tài)鑒定結(jié)果、ITS序列分析比對結(jié)果相對照，發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)發(fā)育分析不能將哈茨木霉、黃綠木霉2個木霉種很