人參土傳真菌病害的生物防治.pdf

1、利用枯草芽孢桿菌防治人參土傳病害是一種高效、安全的植保新途徑，本研究篩選到兩株對(duì)人參立枯絲核菌(Rhizoctonia solani)、尖鐮孢菌(Fusariumoxysporum)等多種病原菌有較強(qiáng)的抑菌效果并且抑菌譜較廣的生防菌株。對(duì)其形態(tài)學(xué)、生理生化和分子生物學(xué)鑒定的基礎(chǔ)上，對(duì)兩菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基、最佳發(fā)酵條件、20L罐發(fā)酵、抗菌粗提物進(jìn)行了研究。
　　 人參病原菌的分離與鑒定。從人參染病的根部、莖部、葉部組織中分離純化兩株

2、病原菌。經(jīng)初步鑒定dg1菌株為立枯絲核菌(Rhizoctonia solani)和c16菌株為尖鐮孢菌(Fusarium oxysporum)。
　　 拮抗菌的分離、純化與鑒定。從人參根際土壤、未栽新土和人參組織中分離純化出32株對(duì)人參立枯絲核菌(R.solani)、人參尖鐮孢菌(F.oxysporum)和人參腐皮鐮孢菌(F. solani)具有拮抗作用的細(xì)菌菌株。通過(guò)復(fù)篩，拮抗細(xì)菌B59和X1菌株對(duì)dg1、c16等真菌抑菌率的

3、平均值達(dá)到90％以上，表明細(xì)菌B59和X1不僅抑菌譜廣，而且抑菌作用明顯，是兩株具有高效抑菌活性的菌株，因此對(duì)細(xì)菌B59和X1進(jìn)行菌株鑒定、發(fā)酵研究和抗菌物質(zhì)分析。
　　 對(duì)B59菌株、X1菌株的形態(tài)特征、培養(yǎng)性狀、生理生化特征和16Sr DNA分子生物學(xué)鑒定，結(jié)果顯示為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)。
　　 通過(guò)正交試驗(yàn)對(duì)B59菌株和X1菌株的培養(yǎng)基成分進(jìn)行優(yōu)化，并通過(guò)單因素試驗(yàn)對(duì)兩菌株的最適培養(yǎng)條

4、件進(jìn)行了研究。B59菌株培養(yǎng)基成分和最適培養(yǎng)條件為：葡萄糖15 g/L，牛肉膏5.0 g/L，NaH2PO4+Na2HPO45 g/L，pH8，250mL三角瓶中裝入25mL培養(yǎng)基，接種量為1.5％，30℃，160 r/min培養(yǎng)。X1菌株的最佳培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件為：葡萄糖15 g/L，牛肉膏+酵母膏(1∶1)5.0 g/L，NaH2PO4+Na2HPO45.0 g/L，pH8，250mL三角瓶中裝入25mL培養(yǎng)基，接種量為1％，25

5、℃，160 r/min培養(yǎng)。優(yōu)化后培養(yǎng)的枯草芽孢桿菌X1和B59菌株對(duì)人參腐皮鐮刀菌(Fusarium solani)抑菌能力顯著提高。
　　 利用優(yōu)化后的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件對(duì)B59和X1菌株進(jìn)行了20L罐發(fā)酵，培養(yǎng)24h后，枯草芽孢桿菌B59菌劑的活芽孢數(shù)為2.6×109cfu/mL；枯草芽孢桿菌X1菌劑的活芽孢數(shù)為2.3×109 cfu/mL。
　　 B59和X1的發(fā)酵液和抗菌粗提物對(duì)供試病原菌均有較強(qiáng)的抑制作用，說(shuō)明