普通小麥春化基因VRN2的克隆及表達(dá)特性分析.pdf

1、以6個(gè)不同春化發(fā)育特性的普通小麥品種為試驗(yàn)材料，通過(guò)RT-PCR擴(kuò)增技術(shù)克隆了春化基因VRN2的CCT保守區(qū)，分析了保守區(qū)43個(gè)氨基酸中3個(gè)關(guān)鍵位點(diǎn)的突變情況；克隆了6個(gè)品種啟動(dòng)子部分區(qū)域，分析其序列特征；研究了春化過(guò)程中ZCCT基因在遼春10號(hào)和京841中的表達(dá)特性。主要研究結(jié)果如下：
　　 1.以6個(gè)不同春化發(fā)育特性普通小麥品種為試驗(yàn)材料，通過(guò)RT-PCR技術(shù)克隆了ZCCT-A1/A2、ZCCT-B1/B2和ZCCT-D1/

2、D26個(gè)基因編碼區(qū)，分析了CCT保守區(qū)中43個(gè)氨基酸16位、35位和39位氨基酸的突變情況。結(jié)果表明：不同品種間ZCCT-A1的CCT功能域的序列存在差異，肥麥有R35W突變，遼春10號(hào)、鄭麥9023、周麥18、豫麥49-198和京841五個(gè)品種均有R39C突變；ZCCT-A2均存在R16C突變；B和D組均未發(fā)現(xiàn)突變。表明VRN2基因編碼區(qū)的等位變異主要體現(xiàn)在A染色體組上，而B、D染色體組上的VRN2基因在參試品種中都為顯性。
　

3、　 2.通過(guò)半定量RT-PCR技術(shù)，分析了春化過(guò)程中強(qiáng)春性遼春10號(hào)和冬性京841的ZCCT-A1/A2、ZCCT-B1/B2和ZCCT-D1/D26個(gè)基因的表達(dá)特性。結(jié)果顯示：ZCCT-A1/A2的表達(dá)均較低，ZCCT-B1/B2和ZCCT-D1/D2隨著春化天數(shù)的增加，表達(dá)量均有逐漸下降趨勢(shì)，且ZCC-B1的表達(dá)量較高；而且，京841的表達(dá)水平顯著高于遼春10號(hào)，表明在參試品中的冬性品種的VRN2抑制春化作用明顯大于春性品種。

4、r>　　 3.通過(guò)PCR特異擴(kuò)增技術(shù)，克隆了6個(gè)品種啟動(dòng)子部分區(qū)域，分析其序列特征。結(jié)果顯示：均擴(kuò)增到目的條帶，說(shuō)明均不是無(wú)效形式(null form)；ZCCT-A1啟動(dòng)子存在3個(gè)SNP；ZCCT-D1啟動(dòng)子也存在3個(gè)SNP；除鄭麥9023外的5個(gè)品種ZCCT-A1在啟動(dòng)子上游97bp處有三個(gè)連續(xù)的TCT重復(fù)序列，而6個(gè)品種ZCCT-B1啟動(dòng)子上游97bp處有2個(gè)連續(xù)的TCT序列。6個(gè)品種ZCCT-B1缺失一個(gè)TCT，推測(cè)這一缺失可