NAD與氫氧化鋁-鋅復合佐劑對HBsAg免疫效果的影響.pdf

1、碩士學位論文學校代碼：學號：10023S2009477NAB與氫氧化鋁／鋅復合佐劑對HBsAg免疫效杲的影響Ef億ctofNicotinamideAdenineDinucleotideCombinedwithAluminumHydroxideorZinkHydroxideinImmuneResponse所院：姓名：指導教師：導師小組：學科專業(yè)：研究方向：InducedbyHBsAg中國醫(yī)學科學院醫(yī)學生物學研究所王琳胡云章研究員胡凝珠主任

2、技師生物化學與分子生物學新型疫苗與疫苗佐劑完成日期：2012年4月中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文摘要乙型肝炎病毒(HeptitisBvirus，HBV)屬于嗜肝DNA病毒科，具有嚴格宿主特異性。HBV感染引起的乙型肝炎是嚴重危害人類健康的傳染病，可引起急性或慢性肝炎，并且與原發(fā)性肝細胞癌的發(fā)生密切相關。隨著新型疫苗和藥物的深入研究，乙型肝炎病毒疫苗和藥物在臨床上已有廣泛應用，但是乙型肝炎病毒感染仍然是全球范圍內影響人類健康的重

3、要因素。據(jù)世界衛(wèi)生組織報告目前在全球范圍內約有4億的人群是乙型肝炎病毒的攜帶者，并且每年仍然有5千萬的人群感染HBV，因此開發(fā)新的HBV預防和治療性疫苗的開發(fā)具有重要的意義。乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)能產生高親和力的中和抗體并與病毒相互作用產生有效的免疫應答，達到預防HBV感染目的，因此在臨床上被廣泛應用于預防HBV感染。雖然HBsAg被認為是目前有效的HBV預防疫苗，但是在疫苗接種人群中仍有10％左右的接種者不能產生高滴度的保

4、護性抗體，從而導致疫苗接種失敗。DNA疫苗能誘生較強的特異性CD8T細胞應答成為人們研究預防和治療性疫苗的熱點，但在大型哺乳動物和人類中所誘導的免疫應答強度相對較低。鑒于目前的乙肝疫苗還存在免疫原性弱的問題，尋找一種有效的免疫佐劑來增強HBsAg蛋白類疫苗誘導的免疫應答效果或改變免疫應答類型是開發(fā)HBV疫苗的策略之一。本文主要在此背景下研究煙酰胺腺嘌呤二核苷酸一氫氧化鋅／氫氧化鋁復合佐劑對乙肝疫苗誘導免疫應答的影響。PonyMatzin

5、ger于1994年提出危險信號模式理論，在該模式中免疫系統(tǒng)的功能是參與識別危險信號分子與非危險信號分子。細胞損傷釋放的危險信號分子可以激活抗原呈遞細胞進而有效的激活T／B細胞產生相應的免疫應答。這也就表明受損細胞釋放的危險信號分子具有潛在的免疫佐劑效應。內源性危險信號具有交叉遞呈抗原，誘導細胞免疫的特性，提示內源性危險信號可作為疫苗佐劑，能夠促進疫苗誘導特異的細胞免疫應答。本研究首次選用內源性危險信號一細胞外基質降解產物煙酰胺腺腺嘌呤二

6、核苷酸作為復合佐劑成分之一，分別與氫氧化鋁及氫氧化鋅聯(lián)合后同HBsAg混合免疫ICR小鼠，實驗分別設HBsAg單獨抗原對照組、氫氧化鋁佐劑對照組及氫氧化鋅佐劑組對照組。經ELISA法和LDH法分別檢測抗HBsAgIgG抗體滴度、IFN吖分泌水平、IL一2分泌水平和CTL細胞免疫效應，得到不同時間的抗HBsAgIgG的抗體滴度、IFN吖分泌水平、IL一2分泌水平和CTL細胞殺傷活性。本研究初步獲得內源性危險信號分子煙酰胺腺嘌呤二核苷酸氫氧