苯并(a)芘和全氟辛烷磺?；衔锫?lián)合暴露對海水青鳉(Oryzias melastigma)胚胎氧化脅迫及內(nèi)分泌干擾作用的初步研究.pdf

1、持久性有機污染物(POPs)的聯(lián)合毒性效應研究一直是生態(tài)毒理學探討的重點和難點。本研究以全氟辛烷磺酰基化合物(Peifluorooctane Sulfonate,PFOS)作為類雌激素代表、苯并(a)芘(Benzo(a)Pyrene,B(a)P)作為抗雌激素代表的POPs對模式魚類海水青鱔(Oryzias melastigma)胚胎進行單獨和聯(lián)合暴露,采用生理生化和分子生物技術(shù)相結(jié)合的方法,從生理機能(心搏率、孵化率和孵化時間)、生化指

2、標(SOD和CAT活力)和基因表達(ERα、Vtgl、Chg L和Chg H)三個層面研究POPs對海洋模式魚類的致毒機制,探討POPs聯(lián)合作用對胚胎毒性的時間-劑量-效應關(guān)系、氧化脅迫程度和內(nèi)分泌干擾等的影響。初步闡述PFOS和B(a)P對海水青鳉(Oryzias melastigma)胚胎的聯(lián)合致毒效應；研究結(jié)果可為篩選用于檢測水體中內(nèi)分泌干擾物的簡易實用的生物標志物提供理論依據(jù)。研究取得如下結(jié)果：
　　 ⑴生理機能觀察結(jié)果

3、表明海水青鳉胚胎對這兩種POPs暴露十分敏感,包括心跳紊亂、孵化率下降和孵化時間縮短等。B(a)P(2、10、50μg/L)和PFOS(4、16 mg/L)均能明顯降低海水青鳉胚胎孵化率；在孵化時間上,胚胎在1 mg/L和4mg/L PFOS出現(xiàn)刺激加快孵化的作用,而B(a)P作用不明顯；在心臟功能上,不同發(fā)育期(4、8、12 dpf)的胚胎心搏均有受B(a)P影響,而PFOS影響不明顯；聯(lián)合作用中,B(a)P和PFOS混合物進一步抑制

4、孵化率、縮短孵化時間,聯(lián)合作用方式為協(xié)同作用。但是,在心臟功能觀察上發(fā)現(xiàn)PFOS能抑制B(a)P對胚胎心搏的影響,呈現(xiàn)拮抗作用。
　　 ⑵抗氧化酶活性測定發(fā)現(xiàn)B(a)P(2、10μg/L)和PFOS(1、4 mg/L)均能明顯影響海水青鳉胚胎SOD和CAT活性,能造成不同發(fā)育期(4、8、12 dpf)胚胎氧化脅迫,高濃度組50μg/L B(a)P和16 mg/L PFOS中未發(fā)現(xiàn)對胚胎抗氧化酶活性的顯著影響；結(jié)果也驗證了SOD和

5、CAT活性變化存在不同步性；聯(lián)合作用中B(a)P和PFOS混合物對SOD和CAT活性聯(lián)合作用方式受劑量、暴露時間等因素影響而存在差異,既有加強又有拮抗,但以加強對海水青鳉胚胎的氧化脅迫作用為主。
　　 ⑶Real-time PCR測定基因表達發(fā)現(xiàn)B(a)P(2、10和50μg/L)和PFOS(1、4和16 mg/L)均能抑制各雌激素效應相關(guān)基因表達,在本研究劑量范圍內(nèi)PFOS抑制強度明顯高于B(a)P,同時結(jié)果表明Vtgl、Ch

6、g L和Chg H基因?qū)ξ廴疚锉┞俄憫菶Rα基因更為敏感。研究結(jié)果進一步驗證B(a)P的抗雌激素效應,同時發(fā)現(xiàn)PFOS(1、4和16 mg/L)由于劑量過高已對海水青鳉胚胎造成細胞毒性,其雌激素效應被掩蓋；聯(lián)合作用中B(a)P和PFOS有明顯的交互作用,表現(xiàn)為PFOS增強B(a)P的抗雌激素效應,B(a)P減弱PFOS對海水青鯔造成的細胞毒性,且均有明顯的劑量.效應關(guān)系。
　　 ⑷PFOS和B(a)P對海水青鳉胚胎造成包括發(fā)育