AtMGT4基因在水稻中異位表達(dá)的初步研究.pdf

1、分類號(hào)學(xué)校代碼AtMGT4基因在水稻中異位表達(dá)的初步研究PreliminaryStudiesonEctopicExpressionofAtMGT4inRice研究生姓名指導(dǎo)教師姓名、職稱學(xué)科專業(yè)研究方向湖南師范大學(xué)學(xué)位評(píng)定委員會(huì)辦公室2012年4月摘要IUllIIIIIIIIIIIIIIIIIl＼2148864擬南芥鎂離子轉(zhuǎn)運(yùn)家族成員(AtMGTs)在鎂離子的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)中發(fā)揮著重要作用，而AtMGT4是其中的一員。實(shí)驗(yàn)室前期的研究發(fā)現(xiàn)，

2、擬南芥過(guò)表達(dá)AtMGT4植株會(huì)產(chǎn)生種子增大的表型。種子大小(千粒重)是糧食作物的重要農(nóng)藝性狀之一。在不明顯改變水稻其他農(nóng)藝性狀的情況下，通過(guò)遺傳改良的手段提高千粒重，對(duì)于增加糧食的產(chǎn)量，增強(qiáng)糧食安全能力有著重要的意義。本研究利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化方法，把Ubi：：AtMGT4基因?qū)胫谢?1水稻，并對(duì)轉(zhuǎn)基因植株性狀進(jìn)行了初步分析。利用基因克隆技術(shù)進(jìn)行AtMGT4的克隆和過(guò)表達(dá)載體的構(gòu)建，由于所使用的植物表達(dá)載體中帶有一個(gè)肉眼可見(jiàn)的報(bào)告基因AsR

3、ed，使得轉(zhuǎn)基因的愈傷組織能夠在篩選階段呈現(xiàn)粉紅色，易于在早期辨別出轉(zhuǎn)基因的愈傷組織，對(duì)統(tǒng)計(jì)轉(zhuǎn)化率起到了重要作用。通過(guò)根瘤農(nóng)桿菌的介導(dǎo)，侵染水稻成熟胚誘導(dǎo)的愈傷組織，獲得了中花11轉(zhuǎn)基因植株。為提高水稻轉(zhuǎn)基因轉(zhuǎn)化效率，比較了EHAl05和Agl0兩種根瘤農(nóng)桿菌菌種侵染中花11愈傷組織的轉(zhuǎn)化率，也比較了使用AAM培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基作為兩種不同的侵染液的轉(zhuǎn)化率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，使用根瘤農(nóng)桿菌EHAl05和AAM作為侵染液，效果較好。對(duì)轉(zhuǎn)基因植