馬唐生防菌Col-68(Colletotrichum hanaui)發(fā)酵工藝及菌藥復配的相關研究.pdf

1、馬唐（Digitaria sanguinalis）是一種常見的農(nóng)田惡性雜草，分布廣泛，且不易防除?，F(xiàn)階段大都利用化學除草劑進行防除。然而，化學除草劑的長期使用容易造成環(huán)境污染、導致雜草耐藥性增加等，對農(nóng)業(yè)發(fā)展的良性循環(huán)危害巨大。生物防治則因安全高效，成為目前除草劑進一步開發(fā)的熱點。然而目前多數(shù)生物除草劑研究開發(fā)進展緩慢，使得真正商品化生產(chǎn)的生物除草劑非常少。菌株Col-68(Colletotrichum hanaui)是本實驗室從馬唐罹

2、病葉片上分離得到的炭疽病菌，前期試驗研究發(fā)現(xiàn)，該菌對馬唐具有很強的專性致病力，但并不侵染水稻、棉花、玉米、大豆、小麥、花生等經(jīng)濟作物及主要草坪草，具有很高的生物安全性。此前已對該菌的生物學特性進行了詳細研究，并進行了遺傳改良。
　　 對生物除草劑潛力菌株的進一步開發(fā)還需要對該菌的發(fā)酵條件做進一步研究，因此在炭疽菌Col-68對雜草馬唐表現(xiàn)良好生防特性研究的基礎上，本實驗以Col-68發(fā)酵濾液對馬唐種子根、芽生長的抑制率為活性指標

3、，綜合不同培養(yǎng)條件下菌株產(chǎn)孢的差異，利用單因素篩選試驗篩選出了適合該菌株發(fā)酵的不同碳氮源、碳氮比及初始碳源適宜濃度。研究結果表明，在初始pH=6.5，每300 mL錐形瓶裝液120 mL，接種100μL菌原液，28℃、160 r·min-1震蕩培養(yǎng)10d的最佳發(fā)酵條件下，菌株活性具有顯著差異，以蔗糖為碳源時Col-68活性、產(chǎn)孢量以及對馬唐根長抑制率最高，蔗糖濃度在30～50 g·L-1之間時菌株產(chǎn)孢量以及對馬唐根長抑制率較高;發(fā)酵最適

4、宜利用的氮源為硝酸鈉，最佳碳氮比則為2.5∶1。同時，不同條件下的發(fā)酵濾液對馬唐根生長的抑制率均明顯高于對芽生長的抑制率。
　　 現(xiàn)階段在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上生物除草劑的使用遠遠無法代替化學除草劑的使用，然而如果能找到一種或幾種能與病原菌聯(lián)合使用的除草劑，從而大幅度減少化學除草劑的使用量同時達到雜草防除的目的是非常有意義的。微生物除草劑與低劑量的化學除草劑復配使用可以有效提高單獨使用的除草效率，菌藥復配具擴大殺草譜，改變寄主選擇性，降低除

5、草成本等多種優(yōu)勢。試驗研究了菌藥復配研究選用不同濃度的常用除草劑阿特拉津、百草枯、精吡氟禾草靈，與馬唐生防菌株Col-68混合培養(yǎng)對其主要生物學指標的影響，結果發(fā)現(xiàn):不同濃度、種類的除草劑對菌絲生長和孢子萌發(fā)影響不同，其中精吡氟禾草靈和阿特拉津對菌株孢子萌發(fā)具有一定增效作用，且在降低使用濃度時對菌絲生長抑制逐漸減少。精吡氟禾草濃度小于15 mg·mL-1和阿特拉津濃度小于100 mg·mL-1時，對菌絲生長抑制幾乎消失。除草劑百草枯對菌