肥料和菌劑配施對紅壤地區(qū)連作花生生育性狀和土壤微生物多樣性的影響.pdf

1、花生是南方低丘紅壤區(qū)的主要油料作物和經(jīng)濟(jì)作物，近年來，隨著花生種植的集約化和規(guī)模化，花生連作障礙日益嚴(yán)重。目前緩解花生連作障礙的方法主要有輪作間作換茬、選用耐連作品種、合理施肥以及施用微生物制劑等。研究施肥和微生物菌劑處理對連作花生生長及土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的影響，可以為緩解花生連作障礙提供相適應(yīng)的肥料和微生物菌劑施用措施。本文通過設(shè)置田間試驗(yàn)和盆栽試驗(yàn)，分析不同肥料和微生物菌劑處理對花生生育性狀的影響;通過直接法從土壤中提取總DNA，利

2、用細(xì)菌通用引物擴(kuò)增16S rDNA V3區(qū)，真菌引物擴(kuò)增18S rDNA，通過DGGE技術(shù)分析不同處理土壤樣品中的微生物群落結(jié)構(gòu)差異;從不同處理土壤中分離芽孢桿菌，通過RFLP技術(shù)分析不同處理土壤樣品中的芽孢桿菌群落多樣性。
　　 田間試驗(yàn)中，復(fù)混化肥+有機(jī)K肥+微肥(T7)處理的花生生長狀況最好，其產(chǎn)量較對照(T8，不施肥)提高了53.99％。復(fù)混化肥對于花生生長最為重要，有機(jī)K肥次之，微肥最小。施用的微生物菌劑也能一定程度上

3、增加花生的產(chǎn)量，枯草芽孢桿菌與光合細(xì)菌聯(lián)合施用(T11)的花生產(chǎn)量比對照提高了32.14％。微生物計(jì)數(shù)結(jié)果顯示，施用微生物菌劑(T9、T10、T11)的土壤樣品所含細(xì)菌和放線菌的數(shù)量有所增多，而真菌數(shù)量減少。通過對不同樣品的DGGE圖譜分析表明，所有處理樣品的細(xì)菌及真菌種類均比較豐富，經(jīng)過微生物菌劑處理的土壤樣品的細(xì)菌種類略微偏多，而真菌則有所減少;經(jīng)過聚類分析發(fā)現(xiàn)，總體上，經(jīng)過微生物菌劑處理的土壤樣品聚集到了一起，不同施肥處理的土壤樣

4、品微生物群落結(jié)構(gòu)差異并顯著。通過對12個(gè)土樣中的可培養(yǎng)芽孢桿菌進(jìn)行16S rDNA的PCR-RFLP分析，共獲得7個(gè)OTUs。多樣性指數(shù)分析表明，施用含有芽孢桿菌菌劑處理的土壤樣品芽孢桿菌多樣性偏低，而其它處理之間相差不大。16S rDNA測序結(jié)果發(fā)現(xiàn)各土壤樣品中芽孢桿菌的優(yōu)勢類型均為枯草芽孢桿菌、臘質(zhì)芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌。施用芽孢桿菌菌劑的土壤樣品所含的臘質(zhì)芽孢桿菌比例要比其它處理高出15％左右。
　　 盆栽試

5、驗(yàn)中，施用微生物菌劑濃度為1010cfu/mL處理(P2、P4、P6)的花生生長狀況總體上要比稀釋10倍的好，芽孢桿菌和光合細(xì)菌混施(P6)的效果最好。微生物計(jì)數(shù)結(jié)果顯示，施用微生物菌劑濃度為1010cfu/m處理的土壤樣品所含細(xì)菌數(shù)量偏多，而真菌數(shù)量偏少，其中芽孢桿菌和光合細(xì)菌混施的樣品最為明顯。通過對不同樣品的DGGE圖譜分析發(fā)現(xiàn)各土壤樣品中所含細(xì)菌及真菌種類均比較豐富。聚類分析則表明各土壤樣品之間相似性相差不大，濃度為1010cf

6、u/mL芽孢桿菌和光合細(xì)菌混施的的土壤樣品的群落結(jié)構(gòu)與對照差異最大。通過對7個(gè)土樣中的芽孢桿菌進(jìn)行16S rDNA的PCR-RFLP分析，共獲得6個(gè)OTUs。多樣性指數(shù)分析表明，總體上，施用芽孢桿菌菌劑處理的土壤樣品的芽孢桿菌多樣性有所減低。16S rDNA測序結(jié)果發(fā)現(xiàn)各土壤樣品中芽孢桿菌的優(yōu)勢類型同樣為臘質(zhì)芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌。施用濃度為1010cfu/mL的芽孢桿菌菌劑的土樣所含臘質(zhì)芽孢桿菌的比例也有一