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文檔簡(jiǎn)介
1、馬尾松(PinusmassonianaLamb.)是中國(guó)南方亞熱帶地區(qū)分布最廣的針葉造林樹(shù)種,其耐干旱瘠薄、適應(yīng)性強(qiáng)、生長(zhǎng)速度快,廣泛用于制漿造紙、建筑、松香等人工林建設(shè)。然而馬尾松良種選育周期長(zhǎng)、良種供應(yīng)不足、無(wú)性繁殖困難,極大地制約著馬尾松高效人工林的發(fā)展,本論文采用ISSR分子標(biāo)記技術(shù),對(duì)湖南城步馬尾松種子園117個(gè)優(yōu)良無(wú)性系親本材料,進(jìn)行群體遺傳結(jié)構(gòu)和遺傳關(guān)系分析,種質(zhì)遺傳異質(zhì)性鑒定;并對(duì)影響馬尾松幼胚體胚發(fā)育的幾個(gè)關(guān)鍵因素進(jìn)行
2、了系統(tǒng)研究,建立了馬尾松體胚發(fā)育技術(shù)體系,以期為發(fā)展馬尾松短周期育種策略提供技術(shù)支撐,主要研究?jī)?nèi)容及成果如下:
1)在117個(gè)無(wú)性系中ISSR標(biāo)記檢測(cè)到豐富的遺傳多樣性。不同種源群體由于受到種質(zhì)起源時(shí)遺傳基礎(chǔ)寬窄的影響以及湖南地理氣候的選擇作用,表現(xiàn)出遺傳多樣性的差異性。10個(gè)ISSR引物共檢測(cè)到的210個(gè)多態(tài)位點(diǎn),位點(diǎn)出現(xiàn)頻率在0.0044~0.9744之間,平均為0.4174;10個(gè)引物的香農(nóng)熵值分布在4.657~6.
3、160之間,平均為5.283;不同種源間P值分布在77.98%~90.37%范圍內(nèi),總的多態(tài)位點(diǎn)百分率P值為96.33%,;6個(gè)種源群體內(nèi)期望雜合度(He)分布在0.3598~0.4252之間,平均為0.3887;種源群體遺傳分化固定指數(shù)Fst值分布在0.3176~0.3414之間,平均為0.3276;種源群體的平均遺傳異質(zhì)性指數(shù)MDIST為0.3306~0.3414之間,平均為0.3352;從以上種源群體遺傳多樣性數(shù)值分析表明,現(xiàn)湖南
4、選育的廣西種源群體無(wú)性系遺傳基礎(chǔ)較窄,遺傳異質(zhì)性高。
2)以Structure2.3.4對(duì)117個(gè)無(wú)性系聚類(lèi)可分為最優(yōu)3組,分組群體間遺傳變異占總變異的11.32%,高于種源模型(2.60%)、地理氣候區(qū)模型(2.77%)和省份模型(2.72%)的AMOVA分析的群體間變異量比例,相應(yīng)的Structure2.3.4模擬分組的群體內(nèi)變異為88.68%,這樣Structure2.3.4的模擬分組分析,提高了不同分組群體間的遺傳
5、變異比例,有利于在不同分組群體內(nèi)選擇雜交親本,提高馬尾松種子園的雜種優(yōu)勢(shì)。種源群體間的遺傳變異比例小于地理氣候分區(qū)群體間遺傳變異比例的結(jié)果表明,
各個(gè)激素影響因素的主次排序?yàn)?-BA>KT>NAA>2,4-D,誘導(dǎo)培養(yǎng)基激素組成優(yōu)方案推薦為:LP+2,4-D2.0mg/L+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L+KT1.0mg/L;對(duì)胚性愈傷組織誘導(dǎo)質(zhì)量而言,激素因素主次排序?yàn)镵T>NAA>2,4-D>6-BA,提高
6、愈傷誘導(dǎo)質(zhì)量的優(yōu)方案推薦為:LP+2,4-D0.5mg/L+6-BA1.5mg/L+NAA0.3mg/L+KT0.5mg/L。低濃度的2,4-D有利于馬尾松胚性愈傷組織的質(zhì)量提高。
7)馬尾松胚性傷增殖培養(yǎng)中,胚性愈傷繼代培養(yǎng)的次數(shù)有限,這與胚性胚柄細(xì)胞團(tuán)內(nèi)胚性細(xì)胞所處的發(fā)育階段以及發(fā)育階段的不同步密切相關(guān)。隨著繼代次數(shù)的增加,胚性愈傷外觀形態(tài)表現(xiàn)上趨于老化,在顯微細(xì)胞學(xué)水平觀察,表現(xiàn)胞質(zhì)濃厚的胚頭細(xì)胞數(shù)量增多、液泡化胚柄
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