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1、<p><b> 畢業(yè)論文</b></p><p> 論文題目:淺談啤酒發(fā)酵工藝</p><p> 專業(yè)班級(jí):09生物技術(shù)及應(yīng)用2</p><p><b> 姓 名: </b></p><p><b> 指導(dǎo)老師: </b></p>&l
2、t;p> 日 期:2012年5月24日</p><p><b> 畢業(yè)論文任務(wù)書(shū)</b></p><p> 論文題目: 淺談啤酒發(fā)酵工藝</p><p> 論文主要內(nèi)容及技術(shù)參數(shù):啤酒發(fā)酵的工藝參數(shù)包括:(1)發(fā)酵周期,由產(chǎn)品類型、質(zhì)量要求、酵母性能、接種量、發(fā)酵溫度、季節(jié)等確定,一般12~24天。(2)酵母接種量,一般
3、根據(jù)酵母性能、代數(shù)、衰老情況、產(chǎn)品類型等決定。(3)發(fā)酵最高溫度和雙乙酰還原溫度,啤酒旺盛發(fā)酵時(shí)的溫度稱為發(fā)酵最高溫度,雙乙酰還原溫度是指旺盛發(fā)酵結(jié)束后啤酒后熟階段(主要是消除雙乙酰)時(shí)的溫度,一般雙乙酰還原溫度等于或高于發(fā)酵溫度,這樣既能保證啤酒質(zhì)量又利于縮短發(fā)酵周期。(4)罐壓,根據(jù)產(chǎn)品類型、麥汁濃度、發(fā)酵溫度和酵母菌種等的不同確定。(5)滿罐時(shí)間,從第一批麥汁進(jìn)罐到最后一批麥汁進(jìn)罐所需時(shí)間稱為滿罐時(shí)間。(6)發(fā)酵度,可分為低發(fā)酵度
4、、中發(fā)酵度、高發(fā)酵度和超高發(fā)酵度</p><p> 要求完成的主要內(nèi)容及達(dá)到的技術(shù)指標(biāo): </p><p> 工作進(jìn)度要求: </p><p><b> 論文目錄</b></p><p> 摘 要根據(jù)工業(yè)啤酒發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程及方法,粗略的介紹其生產(chǎn)流程及現(xiàn)狀,同時(shí)介紹對(duì)一些發(fā)酵啤酒的啤酒酵母的培育的選擇情況,
5、各種經(jīng)過(guò)培育之后的啤酒酵母和傳統(tǒng)啤酒酵母相比之間所具有的優(yōu)勢(shì)等。</p><p> 關(guān)鍵詞:啤酒發(fā)酵,啤酒酵母,露天錐形發(fā)酵罐,菌種培育</p><p><b> 正文</b></p><p><b> 1</b></p><p> 啤酒是在二十世紀(jì)初傳入中國(guó)的,在傳入中國(guó)之后,特別是近幾十
6、年,啤酒工業(yè)在中國(guó)有了飛速發(fā)展,現(xiàn)如今,中國(guó)已經(jīng)是世界上第一大啤酒生產(chǎn)國(guó)家。作為第一,我國(guó)更應(yīng)該將這項(xiàng)技術(shù)進(jìn)行深刻的研究,是這項(xiàng)技術(shù)得到發(fā)展。</p><p> 啤酒發(fā)酵過(guò)程是指啤酒酵母在一定條件下,利用麥汁中的可發(fā)酵性物質(zhì)而進(jìn)行的正常生命活動(dòng),而啤酒就是啤酒酵母在生命活動(dòng)之中所產(chǎn)生的產(chǎn)物。由于酵母菌類型的不同,發(fā)酵的條件和產(chǎn)品要求、風(fēng)味等的不同,造成發(fā)酵方式也不相同。根據(jù)酵母發(fā)酵類型不同可把啤酒分成上面發(fā)酵啤
7、酒和下面發(fā)酵啤酒。一般可以把啤酒發(fā)酵技術(shù)分為傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和現(xiàn)代發(fā)酵技術(shù)?,F(xiàn)代發(fā)酵主要有圓柱露天錐形發(fā)酵罐發(fā)酵、連續(xù)發(fā)酵和高濃稀釋發(fā)酵等方式,目前主要采用圓柱露天錐形發(fā)酵罐發(fā)酵。</p><p> 啤酒釀造的原料為大麥﹑釀造用水﹑酒花﹑酵母以及淀粉質(zhì)輔助原料(玉米﹑大米﹑大麥﹑小麥等)和糖類輔助原料等。其生產(chǎn)大致可分為麥芽制造﹑啤酒釀造﹑啤酒灌裝3個(gè)主要過(guò)程。</p><p> 現(xiàn)在啤酒
8、生產(chǎn)的方法主要有七種,分別是:(1)濃醪發(fā)酵﹕1967年開(kāi)始應(yīng)用于生產(chǎn)。是采用高濃度麥汁進(jìn)行發(fā)酵﹐然後再稀釋成規(guī)定濃度成品啤酒的方法。它可在不增加或少增加生產(chǎn)設(shè)備的條件下提高產(chǎn)量。原麥汁濃度一般為16°P左右。(2)快速發(fā)酵﹕通過(guò)控制發(fā)酵條件﹐在保持原有風(fēng)味的基礎(chǔ)上﹐縮短發(fā)酵周期﹐提高設(shè)備利用率﹐增加產(chǎn)量??焖侔l(fā)酵法工藝控制條件為﹕在發(fā)酵過(guò)程某階段提高溫度﹔增加酵母接種量﹔進(jìn)行攪拌。(3)連續(xù)發(fā)酵﹕1906年已有啤酒連續(xù)發(fā)酵的
9、方案﹐但直到1967年才得到工業(yè)化的應(yīng)用。主要應(yīng)用國(guó)家有新西蘭﹑英國(guó)等。由于菌種易變異和雜菌的污染以及啤酒的風(fēng)味等問(wèn)題﹐使啤酒連續(xù)發(fā)酵工藝的推廣受到限制。(4)圓柱圓錐露天發(fā)酵罐﹕目前最常用的啤酒生產(chǎn)方法,1966年起開(kāi)始應(yīng)用于生產(chǎn)。其主要優(yōu)點(diǎn)為﹕可縮短發(fā)酵周期﹐節(jié)約投資﹐回收CO2和酵母簡(jiǎn)便﹐有利于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)控制。目前單罐容積在600Kl的已很普遍﹐材質(zhì)一般為不銹鋼。(5)純生啤酒的開(kāi)發(fā)﹕隨著除菌過(guò)濾﹑無(wú)菌包裝技術(shù)的成功﹐自70年代開(kāi)始
10、開(kāi)發(fā)了不經(jīng)巴氏殺菌而能長(zhǎng)期保存的純生啤酒。由于口味好﹐很受消費(fèi)者歡迎。目前有的國(guó)家純生啤酒已占整個(gè)啤酒產(chǎn)量的50%。(6)</p><p> 圓柱露天錐形發(fā)酵罐發(fā)酵是目前世界上最常用的發(fā)酵方法,該發(fā)酵方法的罐主體呈圓柱形,罐頂為圓弧狀,底部為圓錐形,具有相當(dāng)?shù)母叨龋ǜ叨却笥谥睆剑?,罐體設(shè)有冷卻和保溫裝置,為全封閉發(fā)酵罐。圓柱錐形發(fā)酵罐既適用于下面發(fā)酵,也適用于上面發(fā)酵,加工十分方便。德國(guó)釀造師發(fā)明的立式圓柱錐形
11、發(fā)酵罐由于其諸多方面的優(yōu)點(diǎn),經(jīng)過(guò)不斷改進(jìn)和發(fā)展,逐步在全世界得到推廣和使用。我國(guó)自20世紀(jì)70年代中期,開(kāi)始采用這種方法,目前國(guó)內(nèi)啤酒生產(chǎn)幾乎全部采用此發(fā)酵法。</p><p> 圓柱露天錐形發(fā)酵罐發(fā)酵有以下特點(diǎn)(1)底部為錐形便于生產(chǎn)過(guò)程中隨時(shí)排放酵母,要求采用凝聚性酵母。(2)罐本身具有冷卻裝置,便于發(fā)酵溫度的控制。生產(chǎn)容易控制,發(fā)酵周期縮短,染菌機(jī)會(huì)少,啤酒質(zhì)量穩(wěn)定。(3)罐體外設(shè)有保溫裝置,可將罐體置于
12、室外,減少建筑投資,節(jié)省占地面積,便于擴(kuò)建。(4)采用密閉罐,便于CO2洗滌和CO2回收,發(fā)酵也可在一定壓力下進(jìn)行。即可做發(fā)酵罐,也可做貯酒罐,也可將發(fā)酵和貯酒合二為一,稱為一罐發(fā)酵法。(5)罐內(nèi)發(fā)酵液由于液體高度而產(chǎn)生CO2梯度。通過(guò)冷卻控制,可使發(fā)酵液進(jìn)行自然對(duì)流,罐體越高對(duì)流越強(qiáng)。由于強(qiáng)烈對(duì)流的存在,酵母發(fā)酵能力提高,發(fā)酵速度加快,發(fā)酵周期縮短。(6)發(fā)酵罐可采用儀表或微機(jī)控制,操作、管理方便。(7)錐形罐既適用于下面發(fā)酵,也適用
13、于上面發(fā)酵。(8)可采用CIP自動(dòng)清洗裝置,清洗方便。(9)錐形罐加工方便,實(shí)用性強(qiáng)。(10)設(shè)備容量可根據(jù)生產(chǎn)需要靈活調(diào)整。</p><p> 錐形罐發(fā)酵方法的組合形式:(1)發(fā)酵——貯酒式,兩個(gè)罐要求不一樣,耐壓也不同,但對(duì)于現(xiàn)代釀酒工藝的應(yīng)用不大。(2)發(fā)酵——后處理式,即一個(gè)罐進(jìn)行發(fā)酵,另一個(gè)罐為后熟處理。對(duì)發(fā)酵罐而言,將可發(fā)酵性成分一次完成,基本不保留可發(fā)酵性成分,發(fā)酵產(chǎn)生的CO2全部回收并貯存?zhèn)溆茫?/p>
14、然后轉(zhuǎn)入后處理罐進(jìn)行后熟處理。其過(guò)程為將發(fā)酵結(jié)束的發(fā)酵液經(jīng)離心分離,去除酵母和冷凝固物,再經(jīng)薄板換熱器冷卻到貯酒溫度,進(jìn)行1~2天的低溫貯存后開(kāi)始過(guò)濾。(3)發(fā)酵——后調(diào)整式,即前一個(gè)發(fā)酵罐類似一罐法進(jìn)行發(fā)酵、貯酒,完成可發(fā)酵性成分的發(fā)酵,回收CO2、回收酵母,進(jìn)行CO2洗滌,經(jīng)適當(dāng)?shù)牡蜏刭A存后,在后調(diào)整罐內(nèi)對(duì)色澤、穩(wěn)定性、CO2含量等指標(biāo)進(jìn)行調(diào)整,再經(jīng)適當(dāng)穩(wěn)定后即可開(kāi)始過(guò)濾操作。</p><p> 啤酒發(fā)酵的
15、工藝參數(shù)包括:(1)發(fā)酵周期,由產(chǎn)品類型、質(zhì)量要求、酵母性能、接種量、發(fā)酵溫度、季節(jié)等確定,一般12~24天。(2)酵母接種量,一般根據(jù)酵母性能、代數(shù)、衰老情況、產(chǎn)品類型等決定。(3)發(fā)酵最高溫度和雙乙酰還原溫度,啤酒旺盛發(fā)酵時(shí)的溫度稱為發(fā)酵最高溫度,雙乙酰還原溫度是指旺盛發(fā)酵結(jié)束后啤酒后熟階段(主要是消除雙乙酰)時(shí)的溫度,一般雙乙酰還原溫度等于或高于發(fā)酵溫度,這樣既能保證啤酒質(zhì)量又利于縮短發(fā)酵周期。(4)罐壓,根據(jù)產(chǎn)品類型、麥汁濃度、
16、發(fā)酵溫度和酵母菌種等的不同確定。(5)滿罐時(shí)間,從第一批麥汁進(jìn)罐到最后一批麥汁進(jìn)罐所需時(shí)間稱為滿罐時(shí)間。(6)發(fā)酵度,可分為低發(fā)酵度、中發(fā)酵度、高發(fā)酵度和超高發(fā)酵度。</p><p> 錐形發(fā)酵罐發(fā)酵啤酒對(duì)工藝的要求為:(1)有效的控制原料質(zhì)量和糖化效果,每批次麥汁組成應(yīng)均勻。(2)大罐的容量應(yīng)與每次糖化的冷麥汁量以及每天的糖化次數(shù)相適應(yīng)。(3)冷麥汁的溫度控制要考慮每次麥汁進(jìn)罐的時(shí)間間隔和滿罐的次數(shù).。(4)
17、冷麥汁溶解氧的控制,根據(jù)酵母添加量和酵母繁殖情況而定。(5)控制發(fā)酵溫度應(yīng)保持相對(duì)穩(wěn)定,避免忽高忽低。(6)應(yīng)盡量進(jìn)行CO2回收,以便于進(jìn)行CO2洗滌、補(bǔ)充酒中CO2和以CO2背壓等。 (7)發(fā)酵罐最好采用不銹鋼材料制作,以便于清洗和殺菌.。</p><p> 錐形發(fā)酵罐發(fā)酵的操作步驟一般為:(1)接種,選擇已培養(yǎng)好的酵母菌作為種子,接種量以滿罐后酵母數(shù)在(1.2~1.5)×10個(gè)/ml為準(zhǔn)。(2
18、)滿罐時(shí)間,滿罐時(shí)間不超過(guò)24h,擴(kuò)培時(shí)可根據(jù)啟發(fā)情況而定。(3)主發(fā)酵,此時(shí)溫度控制在十度左右。(4)雙乙酰還原,主發(fā)酵結(jié)束后,關(guān)閉冷媒升溫至12℃進(jìn)行雙乙酰還原。(5)降溫,雙乙酰還原結(jié)束后降溫。(6)貯酒,在零下一攝氏度左右的溫度下貯酒,貯酒時(shí)間為淡季7天,旺季3天。</p><p> 在發(fā)酵的過(guò)程中,如果酵母緊缺的話還可以在雙乙酰還原后期進(jìn)行一步酵母菌的回收操作。</p><p>
19、; 在發(fā)酵的過(guò)程當(dāng)中,啤酒酵母所起到的作用是不可替代的,同時(shí),研究新型的啤酒酵母之后應(yīng)用于實(shí)踐,對(duì)工業(yè)生產(chǎn)啤酒將有十分巨大的作用,所以,對(duì)新型啤酒酵母的發(fā)展也是在啤酒發(fā)酵研究當(dāng)中所不可缺少的。</p><p> 在啤酒發(fā)酵過(guò)程中,乙醇脫氫酶是釀酒的一種阻礙酶,敲出編碼它的基因可以是釀酒成品量獲得提高,在敲出了sfa1基因后,可以獲得乙醇合成量得到提高的基因突變株。突變株的乙醇產(chǎn)率可以提高8%。</p&g
20、t;<p> 破壞啤酒酵母工業(yè)菌株YSF31的adh2基因,在其基因位點(diǎn)插入來(lái)源于YSF31的GSH1基因和銅抗性篩選標(biāo)記CUP1基因。通過(guò)銅抗性篩選轉(zhuǎn)化子,經(jīng)PCR和乙醇脫氫酶Ⅱ活性測(cè)定,可獲得一種啤酒酵母工程菌,實(shí)驗(yàn)表明,自克隆菌株乙醇脫氫酶Ⅱ活性是受體菌的65%,谷胱甘肽含量比受體菌高34%,其他發(fā)酵指標(biāo)沒(méi)有明顯變化,這一技術(shù)有十分重要的應(yīng)用價(jià)值??梢詤⒖甲鳛槠【漆勗炀?。</p><p>
21、 將啤酒酵母的ECM25基因進(jìn)行敲除,在有氧條件下GSH分泌量在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期比原菌高21%(11度時(shí))和15%(28度時(shí)),同時(shí),在錐形瓶中連續(xù)發(fā)酵后,轉(zhuǎn)化菌成品酒中GSH含量分別提高32%和14%,其它常規(guī)指標(biāo)沒(méi)有明顯的差別,說(shuō)明這是一種有抗老化能力的優(yōu)良啤酒酵母菌種,可以提高啤酒風(fēng)味的穩(wěn)定性。</p><p> 二氧化硫在啤酒中具有抗氧化的功能,所以控制其產(chǎn)量對(duì)降低啤酒的氧化作用,提高啤酒的風(fēng)味就有十分重要的
22、作用,通過(guò)克隆MET14基因,重組表達(dá)質(zhì)粒在啤酒工業(yè)酵母中表達(dá),產(chǎn)生高二氧化硫產(chǎn)量啤酒酵母工業(yè)菌株,對(duì)構(gòu)建新型優(yōu)良啤酒酵母工程菌有十分重大的意義。</p><p> 雙乙酰是啤酒中的重要風(fēng)味物質(zhì),它的形成與消除是啤酒風(fēng)味成熟的重要限速步驟。通過(guò)基因工程手段修飾異亮氨酸-結(jié)氨酸生物合成途徑,可以降低雙乙酰的形成,從而構(gòu)建出一種新型的啤酒酵母菌種。</p><p> 在現(xiàn)今的社會(huì)之中,啤酒
23、被人們所廣泛接受,如何讓啤酒對(duì)人類健康有所幫助,將啤酒變的更加具有風(fēng)味和便于生產(chǎn)等等工業(yè)方面的難題,都在等著人們?nèi)ヒ徊讲降陌l(fā)掘,在研究生產(chǎn)方法和新型菌株構(gòu)建方面,這是不可缺少的,所以,在以后這方面技術(shù)將得到更大的發(fā)展。</p><p><b> 1.1</b></p><p><b> 1.1.1</b></p><p&g
24、t;<b> 1.1.</b></p><p><b> 1.1.3</b></p><p><b> 參考文獻(xiàn) </b></p><p> 1、侯植悌,露天錐形發(fā)酵罐淺談,釀酒,1986(04)</p><p> 2、劉文蘭,錐形罐啤酒發(fā)酵工藝設(shè)計(jì)中相關(guān)的幾個(gè)要點(diǎn),
25、食品與發(fā)酵工業(yè),1991(05)</p><p> 3、Dequin S. The potential of genetic engineering for improving brewing. Wine-making and baking yeasts.Applied Microbiology and Biotechnology,2001</p><p> 4、Russell DW,
26、Smith M,Williamson VM. Nucleotide sequence of the yeast alcohol dehydrogenase Ⅱ gene.Journal of Biological Chemistry,1983(04)</p><p> 5、Kaneda H. Reducing activity and flavor stability of beer.Master Brew A
27、ssoc Am,2000</p><p> 6、宋浩雷,敲除sfa1基因提高釀酒酵母乙醇合成能力的研究,微生物學(xué)報(bào),2007,34(3),421~425</p><p> 7、蔡勇,低乙醇脫氫酶Ⅱ活性的抗老化啤酒酵母工程菌的構(gòu)建,微生物學(xué)報(bào),2008,35(8),1171~1175</p><p> 8、張吉娜,低雙乙??估匣【平湍腹こ叹臉?gòu)建,生物工程學(xué)報(bào)
28、,2005,21(6),942~946</p><p> 9、張一心,啤酒酵母ECM25/YJL201W基因敲除對(duì)啤酒風(fēng)味穩(wěn)定性的影響,生物工程學(xué)報(bào),2008,24(8),1420~1427</p><p> 10、曲娜,高SO2產(chǎn)量啤酒酵母工業(yè)菌株的構(gòu)建,微生物學(xué)報(bào),2006,46(1),38~42</p><p> 11、史文慧,用分子生物學(xué)法提高酵母茵產(chǎn)
29、乙醇的研究,工業(yè)微生物,2002,32(1)</p><p><b> 致謝 </b></p><p> 感謝xx老師對(duì)我的無(wú)私支持與幫助,使我在短時(shí)間內(nèi)完成了畢業(yè)論文,在此我向他們表示感謝! </p><p> 還有我的班主任xx老師及舍友們?cè)谏钌蠈?duì)我的幫助,在此我對(duì)他們表示感謝!</p><p> 最
30、要感謝的是我的父親、母親和家人的關(guān)愛(ài)和培養(yǎng)。特別是我的父母,他們雖然年齡漸大,但卻默默的負(fù)擔(dān)起家中所有的負(fù)擔(dān),始終如一的鼓勵(lì)我完成學(xué)業(yè),他們鼓勵(lì)的話語(yǔ)和對(duì)我未來(lái)的寄托是我求學(xué)的無(wú)窮動(dòng)力。</p><p> 求學(xué)歷程是艱苦的,但又是快樂(lè)的。三年中結(jié)識(shí)的各位學(xué)習(xí)和生活上的摯友讓我得到了人生中最大的一筆財(cái)富。在此,也對(duì)他們表示衷心的感謝!</p><p> 感謝湖北輕職院為我提供的良好的學(xué)習(xí)
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