葡萄座腔菌科(Botryosphaeriaceae)真菌的系統(tǒng)分類研究.pdf

1、樹(shù)木潰瘍類病害包括潰瘍、爛皮、腐爛、干腐、輪紋、瘡痂、流膠、癌腫、枝枯、枯梢等多種類型，能夠在楊樹(shù)、蘋(píng)果、梨樹(shù)、石榴以及松樹(shù)等多種生態(tài)、經(jīng)濟(jì)林木上造成嚴(yán)重危害。我國(guó)樹(shù)木潰瘍病通常由真菌性病原引起，葡萄座腔菌屬BotryosphaeriaCas.被認(rèn)為是最重要的樹(shù)木潰瘍病病原真菌類群。葡萄座腔菌屬真菌的分類鑒定依據(jù)其有性型及無(wú)性型特征，主要是無(wú)性型特征，然而由于對(duì)應(yīng)于葡萄座腔菌的無(wú)性型類型眾多，并且這些無(wú)性型的確定存在很多混亂之處，葡萄座

2、腔菌屬（Botryosphaeria）真菌分類也一直是真菌分類的熱點(diǎn)之一。近年來(lái)的真菌系統(tǒng)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，傳統(tǒng)意義上的葡萄座腔菌是由多個(gè)單系類群構(gòu)成的復(fù)合類群，這些單系類群對(duì)應(yīng)于葡萄座腔菌科的不同屬。本研究主要對(duì)河北省樹(shù)木潰瘍病害進(jìn)行系統(tǒng)調(diào)查，病原分離培養(yǎng)，并對(duì)葡萄座腔菌及其相關(guān)病原真菌進(jìn)行鑒定及系統(tǒng)分類研究，以期了解河北省樹(shù)木潰瘍病害的分布特征以及新的分類系統(tǒng)下樹(shù)木潰瘍類病害與病原之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系。同時(shí)，陜西、山東、重慶等三個(gè)不同地區(qū)的Bo

3、tryosphaeria dothidea菌株進(jìn)行了遺傳多樣性研究。
　　 本研究以河北省8個(gè)市、10個(gè)縣的寄主植物上分離得到的116株葡萄座腔菌科真菌為材料，根據(jù)培養(yǎng)學(xué)特征、形態(tài)學(xué)特征、系統(tǒng)發(fā)育分析對(duì)試驗(yàn)菌株進(jìn)行分類鑒定;應(yīng)用RAPD、ISSR分子標(biāo)記研究了來(lái)自山東、陜西和重慶等三個(gè)省份的不同寄主植物上的病原真菌Botryosphaeria dothidea之間的相互關(guān)系及遺傳分化;應(yīng)用M13分子標(biāo)記技術(shù)結(jié)合系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析，對(duì)

4、來(lái)自河北、山東、陜西、四川、重慶等中國(guó)的5個(gè)省份的43份試驗(yàn)菌株進(jìn)行研究。本研究的主要結(jié)果如下:
　　 1.通過(guò)對(duì)河北省樹(shù)木潰瘍病病害病原研究，確定葡萄座腔菌屬及相關(guān)真菌在中國(guó)的新寄主類型共12個(gè)屬、12個(gè)種植物，包括大葉黃楊（Euonymus japonicus Thunb.）構(gòu)樹(shù)(Broussonetia papyrifera(L.) Vent)、側(cè)柏(Platycladus orientalis(Linn.)Franco）

5、、金銀木(Lonicera maackii(Rupr.)Maxim.)、連翹(Forsythia suspensa(Thunb.) vahl.)、紫荊（Cercis chinensis Bunge.）、二喬玉蘭（Magnolia soulangeana Soul.）、阿月渾子（Pistacia vera L.）、火塵巨樹(shù)（Rhus typhina Nutt.）、花椒(Zanthoxylum bungeanumMaxim.)、美人梅（Pr

6、unus blireana cv.Meiren）、刺梅(Euphorbia milii var.splendens(Bojer ex Hook)Ursch)。
　　 2.利用培養(yǎng)學(xué)、形態(tài)學(xué)、分子系統(tǒng)學(xué)特征將河北省的116份樹(shù)木潰瘍病病原真菌菌株鑒定為B.dothidea、“B”.sarmentorum、“B”.stevensii、“B”.obtusa、Guignardiacitricarpa等5種葡萄座腔菌科真菌。
　　

7、 3.在誘導(dǎo)樹(shù)木潰瘍病菌產(chǎn)生孢子過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)WA培養(yǎng)基上以華山松松針和西黃松松針為材料均可以誘導(dǎo)Botryosphaeriaceae真菌產(chǎn)生孢子。但相同培養(yǎng)條件下西黃松比華山松更容易誘導(dǎo)產(chǎn)孢。
　　 4.應(yīng)用形態(tài)鑒定、rDNA-ITS和EF-1α序列分析，首次確定我國(guó)榿木潰瘍病的病原真菌是B.dothidea。
　　 5.RAPD/ISSR聚類分析結(jié)果顯示:基于Euclid或Dist距離系數(shù)構(gòu)建的NJ聚類樹(shù)顯示，來(lái)自山東

8、、陜西和重慶等三個(gè)省份的42個(gè)試驗(yàn)菌株可以劃分為4個(gè)RAPD/ISSR類群，其中類群Ⅳ是最大的類群，包括19個(gè)菌株，占所有42個(gè)菌株的45％;UPGMA聚類分析表明，42個(gè)B.dothidea菌株的遺傳相似系數(shù)是0.82-0.99，在0.84處被劃分為3個(gè)RAPD/ISSR類群;由于UPGMA聚類樹(shù)劃分類群太少，而且內(nèi)部分支不明顯，因此Euclid或者Dist距離系數(shù)法構(gòu)建的NJ聚類樹(shù)是最優(yōu)聚類樹(shù); B.dothidea存在種內(nèi)遺傳分化