廣西沙田柚變異類(lèi)型遺傳多樣性分析.pdf

1、沙田柚原產(chǎn)于廣西容縣沙田村，至今已有200多年的栽培歷史。目前，全國(guó)沙田柚種植面積約占柚類(lèi)總面積的一半以上。沙田柚為單胚性植物，在引種栽培過(guò)程中，由于實(shí)生變異和受自然環(huán)境的影響，出現(xiàn)了變異品系和變異單株。沙田柚變異類(lèi)型的遺傳多樣性研究是評(píng)價(jià)和利用沙田柚種質(zhì)資源的基礎(chǔ)，對(duì)優(yōu)良基因篩選和新品培育等方面具有重要意義。
　　本研究以30個(gè)沙田柚種質(zhì)為材料，應(yīng)用SRAP分子標(biāo)記技術(shù)從總基因組水平上，cpSSR分子標(biāo)記技術(shù)從葉綠體基因組水平上

2、和核型分析從染色體的形態(tài)水平進(jìn)行遺傳多樣性分析。
　　利用SRAP分子標(biāo)記對(duì)核基因組進(jìn)行遺傳多樣性研究中，共篩選得到63對(duì)多態(tài)性引物，各對(duì)引物擴(kuò)增穩(wěn)定的條帶數(shù)為2-9條，總擴(kuò)增帶數(shù)為252條，平均每對(duì)引物擴(kuò)增帶數(shù)為4條;其中，多態(tài)性條帶數(shù)為129條，平均每對(duì)引物擴(kuò)增獲得2條多態(tài)性條帶，各對(duì)引物多態(tài)性條帶比率為25％-100％，平均每對(duì)引物獲得的多態(tài)性條帶比率為50.33％。利用63對(duì)多態(tài)性引物對(duì)30個(gè)沙田柚種質(zhì)進(jìn)行遺傳多樣性研究，

3、結(jié)果表明:30個(gè)沙田柚種質(zhì)遺傳相似系數(shù)在0.6-1之間，在相似系數(shù)為0.6時(shí)，夏河龍沙田柚與其他29個(gè)種質(zhì)分開(kāi)，獨(dú)居1類(lèi);在相似系數(shù)為0.93時(shí)，30個(gè)沙田柚種質(zhì)，被劃分為11個(gè)組群，其中，第Ⅰ個(gè)組群包含了10個(gè)廣西地方沙田柚種質(zhì)、3個(gè)廣西地方疑似變異單株、四川合江柚、重慶冬瓜圈和江津古老錢(qián)，第Ⅱ個(gè)組群包含長(zhǎng)壽2號(hào)、菊花心等5個(gè)重慶地方品種，其他9個(gè)組群分別只包含1個(gè)沙田柚種質(zhì)。
　　利用cpSSR分子標(biāo)記對(duì)葉綠體基因組進(jìn)行遺傳多

4、樣性研究中，在54對(duì)cpSSR引物中，能擴(kuò)增出穩(wěn)定條帶的有24對(duì)，但這24對(duì)引物在30個(gè)沙田柚種質(zhì)中未擴(kuò)增出差異性條帶。葉綠體基因組序列相對(duì)保守，30個(gè)沙田柚種質(zhì)的葉綠體基因組在24個(gè)基因位點(diǎn)未檢測(cè)到差異條帶，原因可能為:1、30個(gè)沙田柚種質(zhì)的胞質(zhì)為同一單倍型;2、本研究中檢測(cè)位點(diǎn)有限，未能檢測(cè)到變異位點(diǎn)等。
　　在核型分析研究中，30個(gè)沙田柚種質(zhì)染色體都由中部著絲點(diǎn)染色體與近中部著絲點(diǎn)染色體組成，中部著絲點(diǎn)染色體數(shù)目和近中部著絲

5、點(diǎn)染色體數(shù)目相差不大;種質(zhì)間核型不對(duì)稱(chēng)系數(shù)相差不大，范圍在58.34％-65.44％間，平均為62.06％;核型類(lèi)別大多數(shù)屬于1A和2A，也有部分為1B和2B，各種質(zhì)染色體相對(duì)長(zhǎng)度組成在4個(gè)等級(jí)中基本都有分布;30個(gè)沙田柚種質(zhì)平均臂比范圍在1.39-1.92間，平均為1.67，染色體長(zhǎng)度比范圍在1.53-2.88間，平均為1.87;二維進(jìn)化趨勢(shì)分析顯示，進(jìn)化程度較高的是江津古老錢(qián)和太極圖柚，進(jìn)化程度較低的是早熟柚和古老錢(qián)。30個(gè)沙田柚種

6、質(zhì)核型分析聚類(lèi)結(jié)果表明:30個(gè)沙田柚種質(zhì)的聚類(lèi)距離在0-1.7之間，當(dāng)閥值取0.55時(shí)，可以把30個(gè)沙田柚種質(zhì)分成8類(lèi)，第Ⅱ類(lèi)和第Ⅳ類(lèi)所包含的種質(zhì)數(shù)目最多，其它類(lèi)群種質(zhì)數(shù)目較少，聚類(lèi)距離最小的是種質(zhì)早熟沙田柚和夏河龍，種嶺南沙田柚和北碚柚，容縣小果型變異和恭城獅子沙田柚之間，它們間的距離只有0.1;聚類(lèi)距離最大的是容縣本地沙田柚2與興坪沙田柚2、容縣本地沙田柚1之間，它們間的距離為1.7。當(dāng)閥值取1.67時(shí)，可以把30個(gè)沙田柚種質(zhì)分成2