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1、山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文耐苯并咪唑類殺菌劑木霉菌株的篩選及耐藥機(jī)理研究姓名:周紅姿申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):植物病理學(xué)指導(dǎo)教師:劉開啟2003.6.1山東農(nóng)業(yè)火學(xué)碩仁學(xué)位論文摘要本文進(jìn)行了生防木霉菌株的篩選以及生防效果的測(cè)定,通過在含多菌靈平板培養(yǎng)基、紫外線照射和亞硝基胍對(duì)菌株進(jìn)行誘導(dǎo),篩選耐苯并瞇唑類殺菌劑的木霉菌株,并對(duì)木霉菌耐病相關(guān)蛋白進(jìn)行了分離純化及理化特性測(cè)定。自然界分離的木霉菌株,經(jīng)離體篩選和溫室活體篩選,共獲得8株木霉生防菌
2、株(Ty10—2,LT2,T1—12,Tj5—4,Ty111,Tj一1l3,Ty113,Ti33)。這些菌株生長(zhǎng)速度快、抑菌作用強(qiáng),抑菌效果都在70%以上,活體篩選的防效達(dá)50%以上,能有效防治黃瓜灰霉病,且效果穩(wěn)定。,將獲得的8株木霉菌在含藥平板培養(yǎng)基中培養(yǎng)、紫外線照射和用亞硝基廄誘導(dǎo)。在含藥平板培養(yǎng)基中培養(yǎng)篩選得到Ty113,Ty_10一2,Tj一54和LT24株耐多菌靈木霉菌。用紫外線和亞硝基胍誘導(dǎo)沒有篩選出耐藥性菌株。供試菌株在
3、含藥平板培養(yǎng)基上培養(yǎng)24h,耐藥菌株分生孢子萌發(fā),不耐藥菌株的分生孢子不萌發(fā),且耐藥菌株的菌絲前端畸形,較正常菌絲細(xì)短,生長(zhǎng)緊湊。可溶性蛋白和酯酶同工酶電泳分析表明,耐藥菌株中可溶性蛋白種類及含量發(fā)生變化,細(xì)胞內(nèi)可溶性蛋白總含量增加。究其原因可能誘導(dǎo)處理使原木霉菌株中一些基因發(fā)生突變,或者產(chǎn)生耐性基因,使耐藥相關(guān)蛋白產(chǎn)物增多,同時(shí)一些基因轉(zhuǎn)錄活性降低或者不轉(zhuǎn)錄,導(dǎo)致相關(guān)蛋白減少。酯酶同工酶的測(cè)定結(jié)果顯示,耐藥菌株條帶減少或者減弱,可能經(jīng)
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