2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、西北大學(xué)碩士學(xué)位論文豬β腎上腺素能受體的克隆、表達(dá)及初步分離純化姓名：李敏艷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：邊六交20090608Cloning，ExpressionandPreliminaryPurificationofPorcine皮一AdrenergicReceptorAbstractThisstudywasaimedtoprovidehi曲purity傷一adrenergicreceptor(使一AR)forrece

2、ptorchromatographymodelwhichweestablishedtoscreentheeffectiveingredientsindrugsTherefore，weusedgeneticengineeringtechnologytoclonethefull—length&ARgenesequencesinporcinelivertissuesandexpressthesegenesequencesinEcoliinfo

3、rmoffusionproteins，whichwerefurtherseparatedandpurifiedpreliminarilyThathaslaidfoundationforthelarge—scalepreparationof皮一AR(1)Accordingtothefull—lengtheDNAsequencesofporcine仍ARpublishedinGenBank，apairofspecificprimerswer

4、edesignedrespectivelyRTPCRreactionandPCRreactionswerecarriedoutseparatelyinordertoamplifytargetgenessimultaneouslywithpiglivertotalRNAandgenomicDNAastemplaterespectivelyAndthenthetargetgeneswerelinkedtothepUC18vectorinvi

5、tro；whichwasfurthertransformedintocompetentECoilDH5atoscreenpositiveclonesPCRdoubledigestionandsequencingresultsshowedthatbothofthemhadamplifiedl257bptargetgenefragmentencoding418aminoacidsGenBanksequenceofresultsinclude

6、dinthesequenceofporcine皮一ARthanfortheformerto9952％homologyaminoacidarethesameas99，04％；thelatterto9944％homologyaminoacidarethesameas9880％。Boththisstudyandthenthesequencingresultsfortheratioofits9984％homologyaminoacidareth

7、esameas9952％(2)IntheprocessofdesigningprimersrestrictionsiteEc掀1wasaddedtotheupstreamprimerandSalIrestrictionsiteWasaddedtothedownstreamprimerThefull—length皮一ARfragmentwascutofffromthecloningvectorpUC18島一ARbyusingEcoRI／S

8、alIandwaslinkedtothepET32avectorafterdoubleenzymedigestioninvitro，whichWastransformedintocompetentECoilBL21(DE3)forexpressioninEcoliinducedbyIPTGSDS—PAGEdetectionofthewholecellproteinWasperformedbeforeandaftertheIPTGindu

9、ctionComparedwithbeforeinduction，thereisaclear665kDbandafterinduction，indicatingthatthereceptorproteinshadbeenexpressedinformoffusionproteinsRecombinantstrainsofwereinducedatdifferentIPTGconcentrationsandunderdifferentcu

10、lturetimeTheresultsofSDS—PAGEandTLCanalysisshowedthattheconcentrationofIPTGWasabout20mmol／L，about40hinductiontimewhenthehighestamountoffusionproteinexpression，about171％；(3)Becauseoftheintegrationof傷一ARreceptorwith6XHis—t

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