單細胞凝膠電泳誘變檢測系統(tǒng)的研究及應(yīng)用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究將細胞培養(yǎng)利單細胞凝膠電泳結(jié)合起來建立了單細胞凝膠電泳誘變檢測系統(tǒng),并用該檢測系統(tǒng)檢測獸藥添加劑喹烯酮和喹乙醇對DNA的損傷程度.并基于陽性致突變物H<,2>O<,2>作用于非洲綠猴腎Vero細胞引起細胞DNA損傷的原理,研究了其關(guān)鍵步驟-裂解時間,以9.1~273 μ mol/L劑量的H<,2>O<,2>染毒處于對數(shù)生長期的Vero細胞3h后,收獲細胞用于制備三明治凝膠板,分別裂解1h、2h、3h和4h并選擇最適裂解時間.裂解后

2、的細胞進行解旋與電泳、中和、DNA染色和熒光檢測,通過分析彗星樣細胞發(fā)生率和彗尾的長短等指標,證明裂解時間以2~3h為宜.應(yīng)用建立的單細胞凝膠電泳誘變檢測系統(tǒng)檢測喹烯酮和喹乙醇對DNA的損傷程度.喹烯酮染毒劑量在1~5μg/ml時細胞存活率>85﹪,以1~5μg/ml劑量的喹烯酮染毒處于對數(shù)生長期的Vero細胞,后經(jīng)過電泳,通過分析彗星樣細胞發(fā)生率和彗尾長短等指標,結(jié)果表明染毒劑量在2μg/ml對DNA造成中度損傷.喹乙醇染毒劑量在2~

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