hrmA誘導水稻抗病性的研究.pdf

1、從丁香假單胞菌(Psuedomonas syringae pv.syringae)中分離的hrmA基因是在寄主煙草上具有類似無毒基因功能的基因.而且,Ps.syringae處理水稻能誘導水稻產生抗病性.該研究主要是對轉hrmA基因水稻的抗病性進行研究分析.首先對轉hrmA基因植株進行了觀察和分子生物學鑒定.溫室中生長正常小苗移栽至實驗大田生長、結實.根據后期死亡與否、以及結實情況分為三大類,第一類,未及抽穗或者抽穗階段死亡的9個株系;第

2、二類,產生少量穗子但未能結實的8個株系;第三類,正常抽穗和結實的18個株系.該研究中所涉及的株系為11個正常抽穗和結實的第三類株系.PCR檢測T1代以及T2代轉基因的各個株系,得到了8個陽性株系.Northern Blot分析檢測不到這些株系中hrmA基因的表達,RT-PCR分析發(fā)現這些株系間hrmA基因的表達豐度有差異,而CamV35S和Pal啟動子兩種不同啟動子驅動的轉基因水稻中的hrmA基因表達豐度沒有明顯的差異.其次對轉基因水稻

3、的稻瘟病菌抗性進行了分析.對野生型非轉基因水稻致病稻瘟病菌97-220E3活體接種的病情統(tǒng)計結果表明,轉基因水稻的病情要弱一兩個等級.Northern Blot和RT-PCR分析顯示了稻瘟病菌接種前后,轉基因苗的PAL、pBZ1和Gluc等病程相關基因的表達豐度都要比野生型水稻有所提高,甚至表現為弱組成性的表達.這說明hnnA基因誘導水稻對稻瘟病菌的抗性提高,而這種抗性提高可能是通過hrmA基因誘導病程相關基因的提高起作用.最后研究了植

4、物特有的WRKY轉錄因子家族參與hrmA基因誘導水稻抗性提高的基因.采用簡略陣列分析了轉基因樣以及稻瘟病菌誘導樣中WRKY基因和一些病程相關基因(PRs)的變化,89個WRKY基因有21個可能參與了hrmA基因誘導水稻的抗病反應,43個PRs中亦有15個基因參與.Northern Blot和RT-PCR分析了一些WRKY基因驗證陣列的結果表明,這些方法得到的結果基本一致,即WRKY基因家族參與hrmA基因誘導水稻的抗性反應,且這種抗性反