13974.不同葡萄糖濃度對成肌細(xì)胞時鐘基因表達(dá)的影響及其機(jī)制

1、華南師范大學(xué)碩士學(xué)位論文不同葡萄糖濃度對成肌細(xì)胞時鐘基因表達(dá)的影響及其機(jī)制彭桃芳導(dǎo)師姓名職稱：劉承宜教授專業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)院系：生命科學(xué)學(xué)院答辯時間：2013年5月28日摘要不同葡萄糖濃度對成肌細(xì)胞時鐘基因表達(dá)的影響及其機(jī)制專業(yè)名稱：細(xì)胞生物學(xué)申請者姓名：彭桃芳導(dǎo)師姓名：劉承宜教授摘要研究目的：晝夜節(jié)律是影響睡眠和糖尿病等人體健康狀況的一個重要因素。研究表明，高碳水化合物飲食是導(dǎo)致糖尿病的原因之一，高糖也能影響細(xì)胞時鐘基因的表達(dá)。本文研究

2、了不同葡萄糖濃度45mM、225mM、90mM和180mM對C2C12小鼠成肌細(xì)胞時鐘基因周期基因(Period，Per)1、Per2、D元件結(jié)合蛋白基因(albuminD—elementbindingprotein，Dbp)表達(dá)的影響。研究方法：本實(shí)驗(yàn)分為五組，分別為45mM組、225mM組(對照組)、90mM組和180mM組。實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系取同一批處于對數(shù)生長期的C2C12小鼠成肌細(xì)胞。以46104／ml的密度接種于細(xì)胞培養(yǎng)皿，細(xì)胞生長

3、兩天后開始實(shí)驗(yàn)。根據(jù)Asher等人(2008)所用方法，用100nM地塞米松休克處理15min，以同步C2C12小鼠成肌細(xì)胞的時鐘基因表達(dá)時相，然后將C2C12小鼠成肌細(xì)胞分別置于含有終濃度為45mM、225mM、90mM、180mMD一葡萄糖的培養(yǎng)基中，常規(guī)孵育培養(yǎng)。24小時內(nèi)，每隔6h檢測細(xì)胞中時鐘基因Perl、Per2、Dbp和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶(nicotinamideadeninedinucleotide，NAD)依賴的