11014.中國兩棲類病原壺菌檢測與有害生物風險分析(pra)

1、學校代碼：10225學號：B14127學位論文中國兩棲類病原壺菌檢測與有害生物風險分析(PRA)指導(dǎo)教師姓名：申請學位級別：論文提交日期：授予學位單位：馬建章博士朱蘊琦東北林業(yè)大學2014年3月東北林業(yè)大學學科專業(yè)：野生動植物保護與利用論文答辯日期：2014年6月授予學位日期：答辯委員會主席：劉娣教授論文評閱人：素夕厶櫛素大學摘要摘要自1998年首次出現(xiàn)以來，壺菌病已經(jīng)成為全球兩棲類的重要傳染性疾病之一。兩棲類壺菌病已經(jīng)導(dǎo)致全球近200

2、種兩棲類區(qū)域性滅絕，50％的兩棲類種群數(shù)量降低，因此該病被視為目前人類正經(jīng)歷著的唯一一場動物大滅絕的罪魁禍首。并且，由于壺茵及其孢子可以隨水體、兩棲類個體、接觸過的物品等自然因素或隨貿(mào)易全球傳播，這種特性極大地增加了壺菌的擴散風險以及其跨境監(jiān)管和防控的難度。因此，明確我國面臨的壺菌風險，對于有效保護我國兩棲類種群安全、生態(tài)健康和兩棲類貿(mào)易安全都具有重要意義。本研究分為兩個部分，第一部分主要分析了我國國內(nèi)壺菌感染風險，定位了我國壺菌風險水

3、平，為世界各國的生態(tài)健康做出貢獻。針對這一目標，采用了流行病學調(diào)查的方法，結(jié)合國內(nèi)兩棲類種屬分布特點以及牛蛙引種歷史等，確定黑龍江、廣西、四川、云南、湖南、湖北、安徽、河南采樣地區(qū)8個，采集了中國林蛙、虎紋蛙、中華大蟾蜍、牛蛙、澤蛙5種兩棲類樣本386個，利用壺菌培養(yǎng)、鏡檢、病理組織學檢查和分子克隆方法進行陽性樣本檢測；此外，還建立了適用于大面積、快速檢測的壺菌等溫環(huán)介導(dǎo)擴增(LAMP)檢測方法，并應(yīng)用于樣本進行檢測。對于疑似樣本采用熒

4、光實時PCR方法進行復(fù)檢，確保檢測的特異性和靈敏性。經(jīng)檢測，在目標地區(qū)樣本中未檢出壺菌。第二部分主要分析了全球兩棲類壺菌風險的分布，研究并確定了風險等級。本研究是依據(jù)現(xiàn)行中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準《進出境動物和動物產(chǎn)品風險分析程序和技術(shù)要求》(SN／T2486—2010)和新西蘭(BIOSECU砌TYNEWZEALAND對SKANALYSISPROCEDURESVersion1，12April2006)開展：利用描述性研究方法

5、對目標地區(qū)的自然情況、獸醫(yī)組織機構(gòu)、檢疫水平等多項內(nèi)容進行了分析，從傳入釋放可能性、接觸發(fā)生可能性和傳入后果3個方面對潛在的檢疫性有害生物進行評估，確定是否為檢疫性有害生物，并確定傳入的可能性和風險，結(jié)果以定性表達。具體而言，就是利用壺菌釋放評估表、壺菌接觸暴露評估表、壺菌風險后果評估表獲得基礎(chǔ)測量數(shù)據(jù)，經(jīng)釋放評估和接觸暴露評估綜合分析，后果評估與釋放、接觸評估綜合分析，壺菌定植和傳播的可能性評估得到各輸出國、各輸出大洲兩棲類壺菌的風險