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文檔簡介
1、擬南芥NPR1基因是擬南芥中系統(tǒng)獲得抗性的正調(diào)節(jié)基因。為鑒定水稻中一個與擬南芥NPR1基因同源的基因SDKB的功能，本工作構(gòu)建了一個以SDKB為靶基因的RNA干涉水稻表達(dá)載體pCAMB/A1301-ihp，并用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化主栽秈稻品種桂99，共獲得6株潮霉素抗性再生苗。PCR檢測、Southern雜交證實(shí)這些再生苗均為轉(zhuǎn)基因植株。通過反轉(zhuǎn)錄定量PCR分析其中三個轉(zhuǎn)基因株系T1代植株中SDKB基因的表達(dá)水平，結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因植株中S
2、DKB基因的表達(dá)量分別為野生型桂99SDKB基因表達(dá)量的16.15﹪，3.49﹪和15.07﹪，說明轉(zhuǎn)基因植株中SDKB基因表達(dá)明顯受到抑制。對該三個株系的T1代植株分別進(jìn)行水稻白葉枯病菌、稻瘟病菌接種實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因植株白葉枯病病斑長度分別是野生型桂99對照的1.7，1.9和2.3倍，稻瘟病病情指數(shù)分別是對照的1.4，1.7和1.6倍，說明SDKB基因表達(dá)受抑制的轉(zhuǎn)基因植株對水稻白葉枯病和稻瘟病的敏感性均顯著增加，證明水稻SDKB
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