進(jìn)境木質(zhì)包裝材料中傘滑刃屬線蟲的種類鑒定.pdf

1、　　松材線蟲病是林業(yè)上的一種毀滅性病害，給我國的林業(yè)和自然環(huán)境造成了嚴(yán)重的危害。植物檢疫是防止該病發(fā)展的重要措施。在進(jìn)境木質(zhì)包裝檢疫中，除該病的病原物松材線蟲外，還常常截獲同屬于傘滑刃線蟲屬的多種與之形態(tài)非常相似的線蟲。本研究以進(jìn)境木質(zhì)包裝檢疫中截獲的傘滑刃屬線蟲為研究材料進(jìn)行了以下研究：　　從進(jìn)境木質(zhì)包裝材料中截獲八種傘滑刃屬線蟲，分別進(jìn)行了形態(tài)描述和鑒定。其中松材線蟲、擬松材線蟲在進(jìn)境植物檢疫中較為常見，B.rainulfi、B.

2、conicaudatus為近年報(bào)道的新種，B.doui、B.singaporiensis、B.ar…為尚未正式發(fā)表的新種，另有一種(wx5)尚未完成鑒定。國內(nèi)尚未見上述五種線蟲的報(bào)道。本研究將與松材線蟲形態(tài)相似的B.doui、B.singaporiensis和B.conicaudatus與松材線蟲作了比較?！　∵x取尚未完成鑒定的傘滑刃線蟲wx5分離物，以松材線蟲和擬松材線蟲為對(duì)照，做ITS-RFLP分析。ITS通用引物的擴(kuò)增結(jié)果表明松

3、材線蟲和擬松材線蟲ITS區(qū)擴(kuò)增產(chǎn)物都約為940bp，而用ITS引物擴(kuò)增分離物wx5則得到長約為1150bp的片段，表明以ITS-PCR可將該線蟲與其他兩種線蟲區(qū)分開，但不能區(qū)分松材線蟲和擬松材線蟲。利用4種限制性內(nèi)切酶對(duì)松材線蟲和wx5的ITS擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行酶切分析，結(jié)果表明AluⅠ、MspⅠ、Hinf、ⅠHaeⅢ四種限制性內(nèi)切酶對(duì)松材線蟲和wx5擴(kuò)增產(chǎn)物的酶切結(jié)果均有明顯差異。用松材線蟲的特異性引物對(duì)松材線蟲、擬松材線蟲和wx5進(jìn)行IT