肺挫傷早期肺水代謝異常機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討Toll樣受體-4(TLR-4)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、水通道蛋白-1(AQP-1)在肺挫傷早期肺水代謝異常中所起的作用。 材料與方法：選用健康新西蘭大白兔30只(體重2.5-2.8公斤，雌雄各半)，每組6只，隨機(jī)分成5組：對照組、肺挫傷后2小時(shí)組、肺挫傷后4小時(shí)組、肺挫傷后6小時(shí)組和肺挫傷后8小時(shí)組。對照組僅行股動脈插管動態(tài)監(jiān)測生理參數(shù)(心率、血壓、呼吸頻率、血?dú)?的變化。肺挫傷各組家兔行股動脈插管動態(tài)監(jiān)測生

2、理參數(shù)的變化，采用自由落體打擊裝置撞擊右側(cè)胸壁。撞擊條件：金屬球重0.352kg，下落高度1.55±0.13m，撞擊速度5.58±0.22m/s。肺挫傷各組家兔均行胸部X-RAY、CT檢查以明確肺挫傷存在。對照組于術(shù)后8小時(shí)，肺挫傷各組于術(shù)后2、4、6和8小時(shí)4個時(shí)間點(diǎn)放血處死家兔，留取肺組織標(biāo)本：①光鏡、電鏡進(jìn)行組織學(xué)檢查。②ELISA法測定TNF-α、IL-6。⑨免疫組化法測定VEGF，RT-PCR法測定VEGF mRNA、AQP-

3、1mRNA、TLR-4 mRNA。④稱重法測定肺水參數(shù)(肺體比、肺濕干比和肺水含量)。全部數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，以Spss10.0統(tǒng)計(jì)軟件行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，多樣本均數(shù)間比較采用單因素方差分析，兩變量間相關(guān)關(guān)系行Pearson相關(guān)分析，P<0.05表示兩組間比較有差異，P<0.01表示兩組間有顯著差異。 結(jié)果： 1.肺挫傷后生理學(xué)主要變化表現(xiàn)為早期的心率減慢，呼吸增快，血壓下降；病理學(xué)改變主要表現(xiàn)為彌漫性肺泡內(nèi)出血

4、，部分肺泡破裂，肺間質(zhì)水腫，炎性細(xì)胞浸潤。胸部CT平掃顯示肺臟局部出現(xiàn)片狀模糊影。 2.肺組織含水量在肺挫傷后2小時(shí)即開始逐漸增加，與對照組比較差異顯著(p<0.01)。 3.肺挫傷組TNF-α、IL-6呈逐漸上升趨勢，對照組相比，差異有顯著性(p<0.01)。TNF-a高峰出現(xiàn)在傷后4小時(shí)左右。 4.肺挫傷組TLR-4mRNA呈逐漸上升趨勢，高峰出現(xiàn)在傷后6小時(shí)左右；肺挫傷組VEGF表達(dá)在6-8小時(shí)呈逐漸上升趨

5、勢；肺挫傷組AQP-1mRNA表達(dá)逐漸下降。 5.肺組織含水量與VEGF mRNA、AQP-1mRNA表達(dá)量行相關(guān)性分析：VEGF mRNA表達(dá)量與肺組織含水量呈正相關(guān)(r=0.66,p<0.01)，AQP-1mRNA表達(dá)量與肺組織含水量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.79,p<0.01)。 6.TNF-a與TLR-4mRNA表達(dá)量進(jìn)行相關(guān)性分析：TNF-a與TLR-4mRNA表達(dá)量呈正相關(guān)(r=0.46,p<0.05)。

6、結(jié)論： 1.采用自由落體打擊裝置屏氣狀態(tài)撞擊家兔右側(cè)胸壁，撞擊條件為：金屬球重0.352kg，下落高度1.55±0.13m，撞擊速度5.58±0.22m/s。可以成功制作出家兔單純性肺挫傷模型。 2.隨著時(shí)間推移，肺挫傷后各組肺水參數(shù)(肺體比、肺濕干比和肺水含量)有逐漸上升趨勢，表明該模型比較客觀的模擬了肺挫傷早期肺水代謝異常的過程，為研究肺挫傷后肺水腫的發(fā)病機(jī)制提供了良好的基礎(chǔ)。 3.TNF-a-TLR-4mR

7、NA表達(dá)量進(jìn)行相關(guān)性分析：TNF-a與TLR-4mRNA表達(dá)量呈正相關(guān)(r=0.46，p<0.05)。TLR-4開始表達(dá)增加時(shí)間晚于TNF-a，提示肺挫傷發(fā)生后TNF-a的大量表達(dá)促進(jìn)TLR-4表達(dá)的上調(diào)。 4.肺組織含水量與VEGF mRNA、AQP-1mRNA表達(dá)量行相關(guān)性分析：VEGF mRNA表達(dá)量與肺組織含水量呈正相關(guān)(r=0.66,p<0.01)，AQP-1mRNA表達(dá)量與肺組織含水量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.79,p<0