2-羥基-1-萘醛縮4-氨基水楊酸Schiff堿及其金屬配合物的合成、表征與生物活性研究.pdf

1、目的：
　　本課題旨在以4-氨基水楊酸(PAS)與2-羥基-1-萘醛為起始原料，合成一種新型Schiff堿化合物，然后以該Schiff堿為配體(HL)與過渡金屬、稀土合成一系列的Schiff堿金屬配合物(HL-M)，并對(duì)所合成的配體和金屬配合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征。研究系列配合物與牛血清白蛋白(BSA)的相互作用，初步探討此類配合物與牛血清白蛋白的作用機(jī)制。生物學(xué)活性研究通過體外抑菌試驗(yàn)篩選出抗菌活性較好的配合物，測(cè)定其最低抑菌濃度(M

2、IC)和最低殺菌濃度(MBC)，同時(shí)考察配合物對(duì)3種癌細(xì)胞(肝癌細(xì)胞HepG-2、胃癌細(xì)胞SGC、結(jié)腸腺癌細(xì)胞LS174T)生長(zhǎng)的抑制作用。以期獲得抑菌效果更好、抗腫瘤活性更強(qiáng)、毒性更小的新Schiff堿類藥物。
　　方法：
　　1.按照經(jīng)典的醛胺的縮合反應(yīng)，以2-羥基-1-萘醛和4-氨基水楊酸為原料，無水乙醇為溶劑，合成2-羥基-1-萘醛縮4-氨基水楊酸Schiff堿(HL)。通過回流，Schiff堿配體與5種過渡金屬鉻(

3、Cr)、錳(Mn)、鈷(Co)、鎳(Ni)、銅(Cu)和5種稀土元素鑭(La)、鐠(Pr)、釤(Sm)、鋱(Tb)、鉺(Er)分別形成配合物。
　　2.測(cè)定系列配合物的熔點(diǎn)、溶解度等了解其理化性質(zhì)；采用紫外光譜法、紅外光譜法、元素分析法及質(zhì)譜法等進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征。
　　3.采用熒光光譜法研究系列配合物與BSA的相互作用。固定BSA濃度，以逐級(jí)遞增的方式加入一定體積的配體及配合物溶液，掃描其熒光光譜和同步熒光光譜。根據(jù)Stern-

4、Volmer方程和熱力學(xué)方程，計(jì)算得到結(jié)合常數(shù)和熱力學(xué)參數(shù)，以此確定反應(yīng)的熒光猝滅機(jī)制、作用力類型，以及化合物對(duì)蛋白構(gòu)象的影響。
　　4.分別采用抑菌圈試驗(yàn)和MTT實(shí)驗(yàn)來考察配體及其配合物的生物活性。體外抑菌實(shí)驗(yàn)采用抑菌圈實(shí)驗(yàn)測(cè)定PAS、HL及其金屬配合物對(duì)3種細(xì)菌(大腸桿菌，金黃色葡萄球菌、變形桿菌)的抑制作用，從中篩選出抗菌活性好的配體或配合物測(cè)定其MIC和MBC。MTT實(shí)驗(yàn)將藥物濃度設(shè)為高、中、低3個(gè)濃度，選取抗癌活性好的藥

5、物，將濃度擴(kuò)大至6個(gè)梯度濃度，計(jì)算各濃度抑制率和半數(shù)抑制濃度(IC50)，繪制濃度-效應(yīng)曲線。
　　結(jié)果：
　　1.合成了分子式為C18H13NO4的Schiff堿配體，并通過各種方法確定其結(jié)構(gòu)。該配體與10種金屬均形成了配合物，其分子式為C36H26N2O8M·nH2O。
　　2.確定了配合物與牛血清白蛋白反應(yīng)的熒光猝滅機(jī)制為靜態(tài)猝滅，兩者結(jié)合的主要作用力為疏水作用。配合物對(duì)蛋白質(zhì)的構(gòu)象無明顯的影響。
　　3.

6、抑菌試驗(yàn)表明，配體、系列配合物對(duì)三種細(xì)菌均有不同程度的抑制作用，而且形成配合物后抑菌活性明顯增強(qiáng)。其中，鉻配合物的抑菌活性尤為突出。測(cè)定鉻配合物對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的MIC和MBC分別為：0.78μg·mL-1、1.56μg·mL-1、6.25μg·mL-1和12.5μg·mL-1。
　　4.MTT結(jié)果顯示，鉻配合物對(duì)3種癌細(xì)胞均表現(xiàn)出明顯的抗癌活性，并且具有濃度依賴性，對(duì)HepG-2、SGC、LS174T3種癌細(xì)胞作用24