海豚鏈球菌（Streptococcus iniae）全細(xì)胞滅活疫苗的研究.pdf

1、本研究以2003年從廣東省惠東縣分離到的四株S.iniae(HD-1，HD-2，HD-3，HD-4)為材料，初步研究了S.iniae的致病性，篩選出一株免疫效果較好的菌株作為疫苗株，并對該疫苗株與四種不同佐劑制備的全細(xì)胞滅活疫苗的免疫效果進(jìn)行比較和評價?！　￡P(guān)于S.iniae致病性方面，我們選取HD-1株為代表，利用Reed-Muench法計算腹腔注射條件下HD-1株的半數(shù)致死量(LD50)為5.3×106cfu/尾。對人工感染條件下

2、羅非魚的發(fā)病情況進(jìn)行監(jiān)測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)腹腔注射感染的羅非魚同自然條件下發(fā)病魚的臨床癥狀一致，病魚表現(xiàn)出體色發(fā)黑，體表出血，游動姿勢異常等一系列魚類鏈球菌病的典型癥狀。對病魚進(jìn)行剖檢，結(jié)果發(fā)現(xiàn)病魚的腦、腎臟出血；肝臟、脾臟腫大，褪色；胃腸有積水；膽囊腫大，結(jié)合病理組織切片的結(jié)果，可以確定S.iniae是我國養(yǎng)殖魚類鏈球菌病的首要病原?！　⑺闹闟.iniae(HD-1，HD-2，HD-3，HD-4)的培養(yǎng)液滅活后，同佛氏佐劑混合，制備四種佛

3、氏全細(xì)胞滅活疫苗，然后通過腹腔注射免疫羅非魚，經(jīng)過兩次免疫，初次免疫后35天，分別用對應(yīng)的菌株攻毒，統(tǒng)計14天內(nèi)各組魚的死亡情況，計算各免疫組的保護(hù)率(RPS)，并監(jiān)測血清抗體效價的變化。結(jié)果表明使用HD-1株制備的佛氏全細(xì)胞滅活疫苗保護(hù)率達(dá)到91.2％，最高血清抗體凝集效價達(dá)到1：16，免疫效果較好，可作為疫苗株的候選?！　⑦x取的疫苗株(HD-1)培養(yǎng)液經(jīng)滅活處理后，同四種不同的佐劑(佛氏佐劑，鋁膠佐劑，蜂膠佐劑，白油佐劑)混合，