養(yǎng)殖水貂阿留申病感染情況及分子流行病學的研究.pdf

1、應用對流免疫電泳(CIEP)和聚合酶鏈式反應(PCR)方法，對在打皮期從我國主要水貂養(yǎng)殖區(qū)——山東、遼寧和黑龍江3地，隨機采集的38、42和30份水貂樣本的ADV感染情況，進行了對比檢測。兩種方法檢測得到的三地ADV感染陽性率，分別為50.0％、42.8％、66.67％和63.16％、54.76％、86.67％。兩組存在差異的檢測結果，均可在一定程度上說明國內養(yǎng)殖水貂群AD的高感染率；同時，也可反映出CIEP法用于AD檢測時存在的誤差。

2、 對通過PCR方法檢測得到的ADV感染陽性母貂的產仔情況，進行了跟蹤觀察；并使用PCR方法對仔貂分窩時感染ADV的情況進行了檢測?？偨Y觀察、檢測結果，可得到以下結論：1，ADV感染陽性母貂產仔的數(shù)量少，死胎數(shù)及發(fā)育不良的幼仔數(shù)要明顯高于ADV陰性貂。2，實驗中，ADV感染陽性母貂所產幼仔分窩時感染ADV的比例為100％。 有關AD分子流行病學研究中，首先對從山東、遼寧和黑龍江3地分離到的16株ADV毒株VP2基因上的，以

3、超變區(qū)為核心區(qū)域的基因片斷，進行了PCR擴增、克隆和序列測定。借助核酸分析軟件，對獲得的該16株ADV的序列與ADV-G、ADV-Utah1及ADV-K等幾株國外代表性參考毒株的序列進行了比較。在比較分析的基礎上，初步探討了國內ADV分離株基因型的劃分，及它們與國外參考株間的遺傳進化關系，并可得到以下結論：1.多數(shù)ADV國內分離株基因型可劃歸為Ⅱ或Ⅲ型，它們具有與歐美參考株較近的親緣關系，國內AD源于引種的可能性很大；2.國內ADV存在

4、高度遺傳多樣性。ADV-DL1、ADV-DL2這兩株核酸缺失株，以及與國外參考株存在明顯核酸和推導的氨基酸序列差別的ADV-DL5株，可能為國內ADV中明顯有別于歐美參考株的基因型株。其次，對ADV-DL1、ADV-DL2核酸缺失株和ADV-DL5株這3株國內分離株VP2基因上與致病力相關的基因片斷，進行了擴增、克隆和序列測定，并與國外參考株進行了對比分析。結果表明：ADV-DL1、ADV-DL2和ADV-DL5國內分離株與國外參考株，

5、在與致病力相關基因區(qū)上整體變異不大，同源率在93.6％-96.0％之間。ADV-DL1、ADV-DL2和ADV-DL5與國外參考株相對比，均存在特有的氨基酸突變位點。ADV-DL1、ADV-DL2的突變位點相對較少(分別為5和6處)，且根據(jù)突變氨基酸的性質，推斷它們對VP2蛋白空間結構產生較大影響的可能性不大。ADV-DL5與國外參考株間氨基酸突變位點相對較多，共有10處，且其中幾處氨基酸的改變可能對VP2蛋白空間結構產生較大的影響。而