核黃素聯(lián)合紫外光滅活血小板懸液中的病毒及抑制細胞因子的實驗研究.pdf

1、滅活成份血液內(nèi)的病原體、抑制其殘留的白細胞釋放細胞因子是保證臨床安全輸血的一種重要手段。目前,對于血漿的病原體滅活技術(shù)發(fā)展相對成熟,已有部分應(yīng)用于臨床,而對于紅細胞和血小板尚屬于研究階段。先前,有學(xué)者使用亞甲藍(MB)光化學(xué)和補骨酯衍生物(Amotosalen)S-59光化學(xué)可有效滅活血小板內(nèi)模型病毒和白細胞,但MB光化學(xué)法處理的血小板對FⅧ和纖維蛋白原影響較大,而且MB法本身有一定的生物毒性;而經(jīng)S-59處理后的血液,需用特殊儀器將其

2、去除,因此以上兩種方法均不理想。核黃素是人體必需的一種水溶性的維生素,廣泛的存在于人體器官中,它可插入病原體RNA和DNA,在紫外/可見光激活下,發(fā)生電子轉(zhuǎn)移,與病原體核酸的鳥嘌呤共價結(jié)合,介導(dǎo)核酸斷裂。本研究運用紫外光作為激發(fā)光源聯(lián)合核黃素來滅活單采血小板懸液中的指示病毒,同時抑制血小板內(nèi)殘留的白細胞釋放細胞因子。
　　目的：研究核黃素聯(lián)合紫外光進行血小板病毒滅活的安全性、有效性及對血小板保存中白細胞釋放細胞因子抑制作用;觀察滅

3、活后血小板體外各參數(shù)的變化。
　　方法：實驗組:將人巨細胞病毒標(biāo)準株(HCMVAD169)以一定比例注入單采血小板中,混勻后加入核黃素溶液,以一定輻照劑量的紫外光照射,檢測照射前、后病毒滴度和照射后不同時間細胞因子的變化,并觀察體外血小板部分參數(shù)的變化。陰性對照組:為相同來源新鮮單采血小板,同步檢測其細胞因子的含量和血小板體外各參數(shù)。以植物凝集素(PHA)同步刺激兩組血小板,用ELISA方法檢測細胞因子的含量。
　　結(jié)果：實

4、驗組經(jīng)濃度150μmol/L的核黃素結(jié)合輻照劑量為1500mJ/cm2的紫外光(250<λ<350nm)照射10min可有效滅活血小板中病毒;對照組細胞因子含量隨著保存時間的延長而顯著增加;實驗組第3d和第5d的細胞因子含量相對于保存前(0d)差異無顯著意義;而在同一保存時間對照組中細胞因子含量高于實驗組(P<0.05);實驗組和對照組血小板懸液經(jīng)過PHA同步刺激后:接受PHA刺激的對照組與未接受PHA刺激的對照組相比,細胞因子含量顯著