IL-17A促進梗死后心室重構(gòu)及其機制的研究.pdf

1、本文主要從以下幾個方面展開論述:
　　第一部分 IL-17A促進梗死后心室惡性重構(gòu)
　　目的：越來越多的證據(jù)表明，炎癥在心肌梗死后心室重構(gòu)過程中起著重要作用，促使心衰的發(fā)生。本實驗旨在探討細胞因子白介素17A（IL-17A）對梗死后心室重構(gòu)的影響。
　　方法和結(jié)果：通過結(jié)扎C57BL/6小鼠和IL-17A基因敲除小鼠（IL-17A KO）的冠狀動脈前降支來建立心梗模型。心梗模型分為6組：C57BL/6假手術(shù)組（WT s

2、ham），C57BL/6手術(shù)組（WT MI），IL-17A KO假手術(shù)組（IL-17A KO sham），IL-17A KO手術(shù)組（IL-17A KO MI），C57BL/6手術(shù)加IL-17A細胞因子注射組（rIL-17A MI）, C57BL/6手術(shù)加白蛋白注射組（vehicle MI）。利用RT-PCR和Western blot方法來檢測梗死后心肌中IL-17A的表達水平。利用TTC染色和Masson染色的方法來計算心肌梗死后1天和

3、28天的梗死面積；利用Masson染色和明膠酶譜法測定心肌纖維化程度；利用小鼠心功能超聲檢測方法來計算梗死后28天心功能的變化；利用原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)（terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling assay， TUNEL）檢測梗死后28天心肌細胞的凋亡。結(jié)果顯示在梗死后7天時，IL-17A表達量達到高峰；IL-17A KO手

4、術(shù)組在術(shù)后1天和28天的心肌梗死面積均低于rIL-17A手術(shù)組，并且前者在術(shù)后28天的心功能優(yōu)于后者，后者的心肌纖維化程度大于前者；TUNEL結(jié)果顯示IL-17A KO的模型鼠的心肌細胞凋亡率低于WT MI組和rIL-17A MI組。
　　結(jié)論：IL-17A參與了心肌梗死后心室重構(gòu)，增加心肌梗死面積和心肌纖維化程度，誘導(dǎo)心肌細胞凋亡，從而導(dǎo)致心功能惡化。
　　第二部分 IL-17A通過p38-p53-bax信號軸誘導(dǎo)心肌細胞

5、凋亡
　　目的：闡明IL-17A誘導(dǎo)心肌細胞凋亡的分子機制。
　　方法和結(jié)果：分離新生C57BL/6小鼠乳鼠心肌細胞，給予IL-17A刺激，利用Western blot技術(shù)檢測p38MAPKs和p53的磷酸化程度，凋亡調(diào)控因子caspase-3，caspase-9，caspase-8的活化和促凋亡蛋白Bax，抗凋亡蛋白Bcl-2的表達。結(jié)果顯示IL-17A刺激后p-p38，p-p53的表達升高，caspase-3和caspa