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1、第一部分體外培養(yǎng)白血病細(xì)胞不同分割照射方式細(xì)胞存活率的比較 目的:探討相同劑量下不同分割照射方式對(duì)人白血病細(xì)胞K562和S-801存活率的影響。 方法:體外培養(yǎng)人白血病細(xì)胞K562和S-801,進(jìn)行半固體培養(yǎng)基集落形成實(shí)驗(yàn),RADIO-MED軟件擬合劑量.存活曲線,得到相關(guān)參數(shù)D<,0>、D<,q>、N值,分析白血病細(xì)胞的亞致死性損傷修復(fù)能力,并對(duì)比相同劑量下單次照射組與分次照射組(8Gy vs 4Gy×2;12Gy v
2、s 2Gy×2×3)的細(xì)胞存活率差異。 結(jié)果:1.K562和S-801兩種白血病細(xì)胞的劑量.存活曲線肩段都很窄,D<,q>值分別為0.39和0.28;2.相同劑量下單次與分次照射細(xì)胞存活率無(wú)顯著差異(P>0.05)。 結(jié)論:白血病細(xì)胞的亞致死性損傷修復(fù)能力很弱,在分次照射間期幾乎不存在放射損傷修復(fù),相同劑量下單次照射與分次照射效應(yīng)相似。 第二部分不同分割照射方式對(duì)大鼠T淋巴細(xì)胞及亞群CD4+Th/CD8+CTL清
3、除的影響以及對(duì)正常組織損傷的評(píng)價(jià) 目的:探討相同劑量下不同分割照射方式對(duì)大鼠T淋巴細(xì)胞及亞群CD4+Th/CD8+CT[,的清除和正常組織損傷的影響。 方法:健康成年SD大鼠45只隨機(jī)分為空白對(duì)照組、I 8Gy組、Ⅱ4Gy×2組、Ⅲ12Gy組、Iv2Gy×2×3組,模擬人全身放療照射技術(shù),采用6MV X射線全身照射,劑量率10cGy/min,照射后第3天和第7天尾靜脈采血,觀察外周血白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白、血小板變化;
4、照后第七天尾靜脈采血,流式細(xì)胞儀檢測(cè)T淋巴細(xì)胞及其亞群CD4+Th/CD8+CTL變化;分別于照射后第1天和第14天取大鼠肺組織采用免疫組織化學(xué)染色法,半定量分析TGF-β1蛋白在肺組織中的表達(dá),比較不同分割照射方式放射性肺損傷程度,激光共聚焦顯微鏡觀察TGF-β1蛋白在肺組織中的定位;TBI后兩周取大鼠肝腎組織常規(guī)HE染色觀察放射損傷病理組織學(xué)變化,血生化分析儀測(cè)定大鼠肝功能指標(biāo)ALT、腎功能指標(biāo)BUN。 結(jié)果:1.大鼠全身照
5、射后外周血中紅細(xì)胞與血紅蛋白在觀察期間無(wú)明顯變化,白細(xì)胞與血小板呈劑量依賴性降低,白細(xì)胞下降最為顯著。2.T淋巴細(xì)胞總數(shù)及CD4+Th/CD8+CTL細(xì)胞數(shù)在TBI后明顯下降,下降幅度與受照劑量相關(guān),相同劑量下單次照射與分次照射效應(yīng)無(wú)顯著差異(P>0.05)。3.照射后1天及14天大鼠肺組織TGF-β1蛋白免疫組化染色,TGF-β1蛋白在肺組織中的表達(dá)水平照射后第1天,8Gy組與4Gy×2組無(wú)顯著差異(P>0.05),其余各組顯示分次照
6、射較相同劑量下的單次照射表達(dá)水平低(P<0.05),分次照射2Gy×2×3組TGF-β1蛋白表達(dá)水平與單次照射8Gy組無(wú)顯著差異(P>0.05)。4.各TBI照射組肝功能指標(biāo)ALT、腎功能指標(biāo)BUN與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05),觀察期間肝臟、腎臟病理組織學(xué)變化較輕。 結(jié)論:全身放療采用分次照射技術(shù),可適當(dāng)增加照射劑量,增加對(duì)白血病細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞及其亞群CD4+Th/CD8+CTL清除,可保護(hù)正常組織特別是肺組織的放射損傷
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