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1、利用造血干細胞泵出某些熒光染料,如Rho123或Hochest33342,的特性來對其進行分離純化是目前常用的方法之一.Hochest33342拒染的細胞在流式細胞分析中表現(xiàn)為處于底側(cè)部的一群細胞,因此這群細胞又被稱為側(cè)群細胞(side-population)或SP細胞.進一步研究發(fā)現(xiàn),Hochest33342的泵出是由ABC轉(zhuǎn)運蛋白家族的ABCG2基因介導(dǎo)的.ABCG2基因只在早期造血細胞中表達,隨細胞的分化,其表達迅速下調(diào).但是AB
2、CG2基因在早期造血細胞中表達的意義目前還不清楚.在實驗中,我們將ABCG2基因?qū)隟562細胞,觀察了其對細胞行為的影響,以揭示ABCG2可能的生物學(xué)功能.首先,ABCG2轉(zhuǎn)染沒有引起細胞形態(tài)的改變,說明ABCG2不參與細胞骨架相關(guān)的調(diào)節(jié).隨后我們又研究了ABCG2對細胞的三大基本特性—增殖、分化、凋亡—的影響.另外,我們還研究了K562細胞的分化特性.為了研究ABCG2泵出底物的作用機制.我們還構(gòu)建了與綠色熒光蛋白融合表達的ABCG
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