活血化瘀方劑對急性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜BDNF、HO-1、GLAST蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的：檢測中藥活血化瘀方劑對急性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子BDNF、血紅素氧合酶-1HO-1和谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體GLAST蛋白表達(dá)的影響。
　　 方法：健康清潔型Wistar大鼠90只，隨機(jī)分為A、B兩組，各45只。A組用于HE染色，B組用于WesternBlotting。每組又分9小組，均用左眼。以A組為例，AO為正常對照組，A1～A4為實(shí)驗(yàn)對照組，即單純加壓組，A5～A8為實(shí)驗(yàn)組，即中藥治療組。AO組不作處理，A1～A8組

2、大鼠左眼用前房灌注加壓法制作急性高眼壓模型，A1～A4組分別于造模后1d，3d，7d，14d，用過量10％水合氯醛腹腔注射處死動物，取左眼眼球。A5～A8組造模后立即給予活血化瘀方劑灌胃，每日兩次，一次2ml，分別于給藥后1d，3d，7d，14d處死動物，取左眼眼球。B組分組與處理同上，最后取左眼視網(wǎng)膜。
　　 結(jié)果：1、光學(xué)顯微鏡：單純加壓組，模型制作后1d時，視網(wǎng)膜全層高度水腫，厚度增加，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(RGCs)排列疏松

3、，核周出現(xiàn)空泡變性；造模后3d時，視網(wǎng)膜水腫較1d組減輕，RGCs數(shù)目減少;造模后7d時視網(wǎng)膜水腫消失，開始變薄，RGCs排列更加疏松，造模后14d視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)紊亂，厚度明顯變薄，RGCs數(shù)目極少。中藥治療組同時間點(diǎn)的變化趨勢與加壓組相同，但損傷程度均輕于單純加壓組。
　　 2、WesternBlotting結(jié)果：
　　 BDNF:(1)單純加壓組中，BDNF的蛋白相對表達(dá)量在造模后1d時開始升高，并達(dá)到高峰(P＜0.01

4、)，造模后3d時較1d有所下降，但仍較正常對照組高(P＜0.01)，造模后14d時降至最低，低于正常對照組(P＜0.01);(2)中藥治療組中，同時間點(diǎn)的蛋白相對表達(dá)量變化趨勢同加壓組，并且均比同時間點(diǎn)的加壓組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，其中治療后14d時降至正常水平，與正常對照組相比差異無顯著性(P＞0.05)。
　　 HO-1:(1)單純加壓組中，HO-1的蛋白相對表達(dá)量在造模后1d時明顯升高且達(dá)高峰，可達(dá)正常對照

5、組的4倍，差異有高度顯著性(P＜0.01)；造模后3d時相對表達(dá)水平下降至正常水平；造模后7d時再次升高，與正常對照組比差異有顯著性(P＜0.01)；造模后14d時繼續(xù)升高。(2)中藥治療組中，各時間點(diǎn)與正常對照組比較差異均有顯著性(P＜0.01)；與同時間點(diǎn)的加壓組相比，蛋白相對表達(dá)量均高，差異有高度顯著性，(P＜0.01)，且變化趨勢相同。
　　 GLAST:(1)單純加壓組中，GLAST的蛋白相對表達(dá)量在造模后1d時開始升

6、高，并達(dá)到高峰，與正常對照組比差異有高度顯著性(P＜0.01)，造模后3d時相對表達(dá)量下降，仍高于正常對照組(P＜0.01)，造模后7d時降至正常水平(P＞0.01)，造模后14d時維持正常水平。(2)中藥治療組中，治療后1d、3d組與正常對照組比較差異有高度顯著性(P＜0.01)，且高于同時間點(diǎn)的單純加壓組(P＜0.01)；治療后7d時降至正常水平(P＞0.01)，治療后14d時維持正常水平。
　　 結(jié)論：急性高眼壓時，活血化