杜仲葉中綠原酸的提取、純化研究.pdf

1、杜仲(Eucommia ulmoides Oliver)是我國特有的一種落葉喬木，被列為國家二級(jí)保護(hù)植物。我國的杜仲資源十分豐富，主要分布在秦嶺以南山地、湖南、云南、貴州、陜西等省區(qū)，其有效成分綠原酸具有顯著的清熱解毒、抗菌消炎、保肝利膽及提高機(jī)體免疫力等作用，具有良好的發(fā)展前景。近年來，國內(nèi)對(duì)杜仲的研究主要集中于杜仲皮藥材質(zhì)量及化學(xué)成分研究以及綠原酸的粗提取分離研究，我國大部分廠家只能生產(chǎn)附加值很低、純度在20-50％的杜仲綠原酸，高

2、純度的綠原酸分離純化還存在許多問題，如生產(chǎn)成本高且得率低。因而，從杜仲葉中分離純化獲得高純綠原酸，同時(shí)解決這些問題已迫在眉睫。 本文對(duì)從杜仲葉提取分離綠原酸進(jìn)行了研究，其結(jié)果如下： 1.在文獻(xiàn)基礎(chǔ)上建立了綠原酸的液相色譜檢測(cè)方法。 高效液相色譜檢測(cè)條件是：色譜柱：KromasiLC<,18>(250×4.6mm，5 μm)；檢測(cè)波長：328nm；流動(dòng)相：水：甲醇：磷酸=75: 25：0.4，流速：1mL·min～

3、；柱溫：30℃。該方法靈敏度高，適合綠原酸的精確測(cè)定。 2.對(duì)綠原酸的穩(wěn)定性進(jìn)行了研究，結(jié)果表明綠原酸在60℃以內(nèi)，4-6h較穩(wěn)定。在堿性條件下易分解，在pH=3的酸性條件下最穩(wěn)定，綠原酸在強(qiáng)光照射下不穩(wěn)定，因此在綠原酸的提取分離中應(yīng)盡量保持在酸性、避光條件下進(jìn)行。 3.比較研究了綠原酸的提取溶劑和提取方法，結(jié)果發(fā)現(xiàn)提取溶劑水和加熱提取較好。之后采用正交試驗(yàn)考察了溫度、時(shí)間、固液比和顆粒度4因素，對(duì)加熱提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化

4、，結(jié)果表明：溫度65℃，提取時(shí)間60min，固液比1:25，顆粒度為40目時(shí)較好。 4.進(jìn)行了綠原酸的柱層析優(yōu)化條件的研究。通過對(duì)吸附劑、洗脫劑等進(jìn)行比較研究，結(jié)果表明以KLFC-150，樹脂為吸附劑、以乙醇為洗脫劑為最優(yōu)條件，以此方法分離綠原酸，純度和收率都較高，純度達(dá)到56.67％，收率為78.3％。 5.采用結(jié)晶方法進(jìn)一步對(duì)綠原酸粗品進(jìn)行純化的研究。對(duì)綠原酸的結(jié)晶試劑和結(jié)晶條件進(jìn)行了優(yōu)化研究，結(jié)果綠原酸結(jié)晶的最佳條