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文檔簡介
1、目的:對不同年齡的兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的黏彈性進(jìn)行定量的檢測,以從細(xì)胞水平闡明關(guān)節(jié)軟骨的退變過程,了解生物力學(xué)因素在骨性關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)理中的作用。為軟骨組織工程中相關(guān)力學(xué)因素的研究提供新思路和新方法,為軟骨組織工程種子細(xì)胞時機(jī)的選擇提供理論依據(jù)。 方法:15只雌性新西蘭白兔,按照年齡分為3組:幼年組5只(約6周齡)、成年組5只(約7月齡)、老年組5只(約31月齡)。各組實驗動物均用空氣栓塞處死,取左側(cè)膝關(guān)節(jié)標(biāo)本做大體觀察,同時進(jìn)行石蠟切
2、片HE染色觀察關(guān)節(jié)軟骨隨年齡增長的組織學(xué)變化:利用透射電鏡觀察隨年齡增長關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化;利用激光共聚焦掃描顯微鏡(laser confocal scanning microscope LCSM)對軟骨細(xì)胞直徑進(jìn)行檢測;利用微管吸吮技術(shù)(micropipette aspiration)結(jié)合半無限體細(xì)胞力學(xué)模型(Half-space model)對右側(cè)膝關(guān)節(jié)所分離的軟骨細(xì)胞進(jìn)行黏彈性的檢測。 結(jié)果:不同年齡兔關(guān)節(jié)軟骨的大
3、體觀察及HE染色觀察都有明顯的變化,即關(guān)節(jié)軟骨隨著年齡的增長將會發(fā)生退行性改變;透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)老年組軟骨細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)發(fā)生了明顯的變化;幼年軟骨細(xì)胞的直徑為8.84±0.97μm、成年軟骨細(xì)胞的直徑為9.77±1.41μm、老年軟骨細(xì)胞的直徑為11.50±1.76μm,統(tǒng)計分析表明三者兩兩之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.001)。關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞表現(xiàn)為典型的黏彈性固體蠕變特性,隨著年齡的增長,其黏彈性參數(shù)(瞬時模量E<,0>、平衡模量E<
4、,∞>、表觀黏性μ)逐漸降低,幼年組E<,0>(中位數(shù)±四分位數(shù)間距)為0.68±0.15kaPa、E<,∞>為0.38±0.16kPa、μ為6.42±1.36 kPa·s;成年組E<,0>為0.63±0.10kPa、E<,∞>為0.33±0.06kPa、μ為5.84±1.35 kPa·s;老年組E<,0>為0.56±0.08kPa、E<,∞>為0.28±0.05kPa、μ為4.06±0.71kPa·s。統(tǒng)計學(xué)分析表明幼年組及中年組的黏
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