姬松茸（Agaricus blazei Murill）提取物組分體外抗病毒和抗腫瘤活性研究.pdf

1、姬松茸(Agaricus blazei Murill)原產于美國、巴西等地，又名巴西蘑菇，其水溶液的酒精沉淀物中含有大量姬松茸多糖、糖蛋白復合物、甾醇類等物質，具有抗病毒、抗癌等生物學功能。姬松茸提取物組分具有綠色、低毒、應用后對人體毒副作用小等特點，為新型天然抗病毒、抗腫瘤藥物的研究及制備提供了良好的材料。 本文通過熱水浸提、梯度酒精沉淀和真空冷凍干燥等方法，得到了5種姬松茸提取物組分(E1～5)，成分分析實驗證明蛋白和多糖是

2、這5種組分的主要組成成分。利用大菱鲆鰭細胞(turbot fin cells，TF細胞)進行的5種組分的細胞毒性實驗結果顯示，5種姬松茸提取物組分在濃度低于1.0 mg/mL時，對TF細胞沒有任何毒性，而濃度高于1.5 mg/mL時，細胞雖然透光性依然很好，但是開始收縮變圓，且細胞的形態(tài)改變同姬松茸提取物組分的濃度成正相關。 通過5種姬松茸提取物組分對淋巴囊腫病毒(lymphocystis disease virus，LCDV)

3、感染TF細胞的過程的影響來研究姬松茸提取物組分與LCDV的相互關系。結果顯示：用5種姬松茸提取物組分，尤其是E5組分(1.0mg/mL)處理2h后的LCDV感染TF細胞，能夠明顯抑制LCDV感染所導致的TF細胞病變程度。將LCDV和5種姬松茸提取物組分混合后感染TF細胞，也能明顯抑制LCDV感染所引起的TF細胞病變，表明姬松茸提取物組分可能有直接滅活病毒和/或阻斷病毒吸附細胞的作用。TF細胞經LCDV吸附4h后再添加姬松茸提取物組分培養(yǎng)

4、，細胞病變程度并不改變，表明5種姬松茸提取物組分對LCDV在TF細胞內的繁殖并無顯著的抑制作用。 為闡明姬松茸的抗腫瘤作用及機理，本文利用人宮頸癌細胞(human cervical carcinoma cell line，HeLa)、人肝癌細胞(human hepatocellularcarcinoma cell line，HepG2)、人胃癌細胞(human gastric carcinoma，cell line，SGC)，通

5、過細胞計數(shù)，光學顯微鏡觀察，瓊脂糖凝膠電泳，透射電鏡等方法，對所得的5種姬松茸提取物組分體外誘導3種腫瘤細胞凋亡的作用進行了研究。細胞計數(shù)結果顯示，5種提取物組分對HeLa、HepG2、SGC細胞均有不同程度的抑制作用，E4組分的抑制3種腫瘤細胞增殖效果最好。添加E4組分，濃度為1.5mg/mL，培養(yǎng)HeLa、HepG2、SGC細胞72h，抑制率分別為84.04％、77.79％、60.27％。HeLa、HepG2、SGC細胞經E4組分處

6、理后出現(xiàn)核固縮、膜起泡、凋亡小體形成等現(xiàn)象，并且瓊脂糖凝膠電泳結果顯示典型梯狀條帶(DNA ladder)。然而，同樣濃度的E4組分并不能誘導TF細胞和人角膜內皮細胞(human corneal endothelial，HCE)發(fā)生DNA片段化，表明姬松茸提取物具有細胞選擇性毒性的特征。 綜上所述，本文利用熱水浸提、酒精沉淀等方法得到了5種姬松茸提取物組分，并研究了它們在體外抗病毒感染以及誘導腫瘤細胞凋亡等方面的作用。為全面查清