人體內(nèi)血清pro-Hepcidin水平檢測及其在臨床診斷中應(yīng)用的初步研究.pdf

1、前言：新發(fā)現(xiàn)的小分子肽hepcidin被證實(shí)在鐵代謝過程中起核心作用，與慢性病貧血、遺傳性血色病等關(guān)系密切。Hepcidin是一種急性期蛋白，在肝細(xì)胞中合成，通過內(nèi)化降解小腸上皮基底面和巨噬細(xì)胞表面的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)受體FN1，干擾了鐵從腸道的吸收和從巨噬細(xì)胞的釋放。目前關(guān)于hepcidin的研究多局限于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物階段，而在臨床研究中，由于血hepcidin分子太小，檢測困難，因此難于采用非創(chuàng)傷性方式進(jìn)行檢測人體內(nèi)hepcidin水平?；趆epc

2、idin前體物質(zhì)pro-Hepcidin的抗體的ELISA檢測試劑盒則已經(jīng)商品化，但是臨床應(yīng)用的結(jié)果缺乏一致性，目前尚不能證實(shí)其與肝臟hepcidinmRNA合成水平之間的相關(guān)性。 研究目的： 首先分析同一患者肝臟hepcidinmRNA合成水平和血pro-hepcidin水平之間的相關(guān)性。 其次，通過檢測正常對(duì)照、肝硬化和/或肝癌、慢性病貧血(ACD)和缺鐵性貧血(IDA)患者的血pro-hepcidin水平，

3、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析血pro-hepcidin在不同鐵儲(chǔ)備I臨床疾病時(shí)的水平差異，進(jìn)一步驗(yàn)證血pro-hepcidin與體內(nèi)和hepcidin活性之間的關(guān)系。 最后，我們檢測急性心肌梗死患者起病后不同時(shí)間的血pro-hepcidin水平，探討血pro-hepcidin是否隨著急性心肌梗死這樣一個(gè)應(yīng)激所致的炎癥因子的刺激而改變。 研究方法： 1、收集外科肝臟切除術(shù)患者的肝臟標(biāo)本21例，RT-PCR后進(jìn)行紫外熒光顯像，以Hep

4、cidin與G3PDH的mRNA比值進(jìn)行半定量分析。 2、同時(shí)收集第一部分研究中肝硬化和/或肝癌患者的術(shù)前血清，以及正常對(duì)照、ACD患者和IDA患者的血清。 3、根據(jù)發(fā)病后不同時(shí)間收集15例再通治療后的急性心肌梗死患者的血清。 4、血清在-20℃短期貯存后，采用商品化的ELISA試劑盒檢測pro-hepcidin水平。 5、采用商品化ELISA試劑盒檢測正常對(duì)照租ACD患者血IL-6水平。 6、同

5、時(shí)收集血紅蛋白水平、肝功能、血清鐵蛋白水平等指標(biāo)。 7、統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)用SPSS軟件，進(jìn)行非參數(shù)檢驗(yàn)和t檢驗(yàn)，p值＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 研究結(jié)果： 1、在肝炎后肝硬化和/或肝癌患者中，人肝臟HepcidinmRNA表達(dá)水平與血清pro-Hepcidin水平正相關(guān)。 2、血清pro-Hepcidin水平和IL-6與血清鐵蛋白水平負(fù)相關(guān)，與血紅蛋白水平正相關(guān)。 3、ACD患者血清pro-hepcid

6、in水平顯著低于正常水平。 4、肝硬化和/或肝癌患者血清pro-hepcidin水平顯著低于正常水平。 5、IDA患者血清pro-hepcidin水平顯著高于正常水平6急性心肌梗死再通治療后血pro-hepcidin水平在60小時(shí)內(nèi)沒有顯著的動(dòng)態(tài)演變。 結(jié)論： 1.在肝炎后肝硬化和/或肝癌患者中，血清pro-hepcidin水平可能反映肝臟hepcidinmRNA合成水平，但結(jié)論受限于研究人群和研究方法。