S-100、C-kit、HIF-1α、VEGF和TGF-β-,1-在兒童先天性巨輸尿管癥中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:通過(guò)免疫組化學(xué)方法研究S-100、C-kit、HIF-1α、VEGF和TGF-β1在兒童先天性巨輸尿管癥輸尿管組織中的表達(dá)，從而觀(guān)察S-100陽(yáng)性的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)目和C-kit陽(yáng)性的Cajal間質(zhì)細(xì)胞數(shù)目在兒童先天性巨輸尿管癥中的變化情況，探討HIF-1α、VEGF和TGF-β1在兒童先天性巨輸尿管癥發(fā)病中的作用。 方法:收取1999年1月至2007年12月山東大學(xué)齊魯醫(yī)院小兒外科收治25側(cè)先天性巨輸尿管末端輸尿管（末端組）

2、和擴(kuò)張段輸尿管組織（擴(kuò)張組）石蠟標(biāo)本，另取28例腎母細(xì)胞瘤輸尿管下段無(wú)腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)的標(biāo)本作對(duì)照組。將末端組25側(cè)和擴(kuò)張組25側(cè)按年齡各分為小于1歲組10側(cè)，1～3歲組8側(cè)，大于3歲組7側(cè)；將對(duì)照組按年齡分為小于1歲組8例，1～3歲組10例，大于3歲組10例。 采用免疫組化SP法對(duì)各組進(jìn)行S-100、C-kit、HIF-1α、VEGF和TGF-β1染色，計(jì)算末端組、擴(kuò)張組和對(duì)照組平均高倍鏡下S-100陽(yáng)性的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)、C-kit

3、陽(yáng)性的Cajal間質(zhì)細(xì)胞數(shù)及S-100染色高倍鏡平均光密度值，計(jì)算小于1歲組、1～3歲組、大于3歲組HIF-1α、VEGF和TGF-β1染色高倍鏡平均光密度值。 t檢驗(yàn)分析末端組、擴(kuò)張組和對(duì)照組中S-100染色平均光密度值、S-100陽(yáng)性的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)和C-kit陽(yáng)性的Cajal間質(zhì)細(xì)胞數(shù)的差異。直線(xiàn)回歸方法分析三組中S-100陽(yáng)性的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)和C-kit陽(yáng)性的Cajal間質(zhì)細(xì)胞數(shù)之間的關(guān)系。單因素方差分析和最小顯著差異方法

4、（LSD）分析三組中各年齡組HIF-1α、VEGF和TGF-β1染色平均光密度值的差異。 結(jié)果: 1.S100染色、S100陽(yáng)性神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)和C-kit陽(yáng)性Cajal間質(zhì)細(xì)胞數(shù)變化 末端組中S100陽(yáng)性神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)及平均光密度值較擴(kuò)張組和對(duì)照組明顯減少，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；擴(kuò)張組S100陽(yáng)性神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)及平均光密度值和對(duì)照組相比，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。末端組C-kit陽(yáng)性Cajal間質(zhì)細(xì)胞數(shù)與擴(kuò)張組和對(duì)照組相比明顯

5、減少，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。擴(kuò)張組C-kit陽(yáng)性Cajal間質(zhì)細(xì)胞數(shù)和對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.S100陽(yáng)性神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)和C-kit陽(yáng)性Cajal間質(zhì)細(xì)胞數(shù)相關(guān)性分析 對(duì)照組神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)和Cajal間質(zhì)細(xì)胞數(shù)相關(guān)性分析，r=0．89，兩者存在正相關(guān)關(guān)系，直線(xiàn)回歸分析b=1．08，直線(xiàn)回歸方程=-0．38+1．08x（以神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)為自變量，Cajal間質(zhì)細(xì)胞數(shù)為應(yīng)變量）；末端輸尿管組織中神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和Cajal間質(zhì)細(xì)

6、胞相關(guān)性分析，r=0．96，兩者存在正相關(guān)關(guān)系，直線(xiàn)回歸分析b=0．81，直線(xiàn)回歸方程=-0．38+0．81x（以神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)為自變量，Cajal間質(zhì)細(xì)胞數(shù)為應(yīng)變量）。擴(kuò)張輸尿管神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和Cajal間質(zhì)細(xì)胞相關(guān)性分析，r=0．94，兩者存在正相關(guān)關(guān)系，直線(xiàn)回歸分析b=1．33，直線(xiàn)回歸方程=-1．94+1．33x（以神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)為自變量，Cajal間質(zhì)細(xì)胞數(shù)為應(yīng)變量）。 3.HIF-1α、VEGF和TGF-β1染色在各年齡組中

7、的變化HIF-1α、VEGF和TGF-β1在對(duì)照組、擴(kuò)張組和大于3歲末端組中表達(dá)極少或陰性，在小于1歲末端組和1～3歲末端組中表達(dá)增強(qiáng)。三指標(biāo)平均光密度值單因素方差分析F值分別為124．601、37．956、46．200，P值均小于0．01，可認(rèn)為三指標(biāo)在不同年齡組的表達(dá)不完全相等。 用最小顯著差異方法（LSD）兩兩比較分析發(fā)現(xiàn)：三指標(biāo)在小于1歲末端組表達(dá)較同齡對(duì)照組和擴(kuò)張組明顯增強(qiáng)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；三指標(biāo)在1～3歲組末端組

8、表達(dá)較同齡對(duì)照組和擴(kuò)張組增強(qiáng)，但較小于1歲末端組減弱，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；三指標(biāo)在大于3歲末端組表達(dá)與同齡對(duì)照組和擴(kuò)張組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；三指標(biāo)的表達(dá)在同齡對(duì)照組和擴(kuò)張組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論:S-100蛋白和C-kit蛋白在兒童先天性巨輸尿管末端輸尿管組織中表達(dá)減少， S-100陽(yáng)性的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)和C-kit陽(yáng)性的Cajal間質(zhì)細(xì)胞數(shù)關(guān)系密切，兩細(xì)胞數(shù)的減少密切參與兒童先天性巨輸尿管發(fā)病過(guò)程。HIF-1α、VEGF和TG