不同類型牙周炎患者外周血中輔助性T細(xì)胞亞群及齦溝液內(nèi)IL-17的檢測(cè).pdf

1、目的:
　　牙周炎是發(fā)生在牙周組織的感染性疾病。牙周致病菌和宿主免疫反應(yīng)共同作用影響牙周炎的發(fā)展。輔助性T細(xì)胞(help T cell，Th)具有輔助其他免疫細(xì)胞分化和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的作用。因此本研究以牙周炎患者為研究對(duì)象，用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其外周血中輔助性T細(xì)胞亞群Th1/Th2/Th17的水平，并用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測(cè)齦溝液(gingival crevicular fluid, GCF)中白細(xì)胞介素-17(IL-17)的水

2、平，以便為牙周炎的發(fā)病過(guò)程提供免疫學(xué)的依據(jù)，進(jìn)一步從免疫平衡角度闡述牙周炎發(fā)病機(jī)制并為其治療提供理論依據(jù)。分析IL-17與牙周炎各項(xiàng)臨床指標(biāo)間的關(guān)系，探討IL-17在牙周炎發(fā)病機(jī)制、病情進(jìn)展等方面所起的作用。
　　方法:
　　選擇河北省口腔醫(yī)院口腔內(nèi)科門診檢查患者，成人（慢性牙周炎組18-50歲，侵襲性牙周炎組18-35歲）。根據(jù)口腔情況分為3組:慢性牙周炎患者(CP)11例，侵襲性牙周炎患者(AgP)8例和健康對(duì)照組10例

3、，檢查全口余留牙齒，詳細(xì)記錄每顆牙的牙周情況及除第三磨牙外的所有缺牙數(shù)。牙周檢查包括:菌斑指數(shù)(PLI)、探診深度(PD)、附著喪失(AL)、出血指數(shù)(BI)等，同時(shí)拍攝常規(guī)X線曲面斷層片輔助診斷。
　　1、檢測(cè)外周血中Th1/Th2/Th17水平:
　　清晨空腹采集受檢者外周靜脈血2ml肝素抗凝，檢測(cè)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)（中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞）。
　　每例樣本設(shè)檢測(cè)管和對(duì)照管，各取新鮮抗凝外周血

4、100μl，各檢測(cè)管分別加入相應(yīng)檢測(cè)抗體，對(duì)照管加入同型對(duì)照抗體，流式細(xì)胞儀上機(jī)檢測(cè)Th1/Th2/Th17水平。
　　2、檢測(cè)齦溝液內(nèi)IL-17的水平:
　　所有受檢者均選取六顆指數(shù)牙(16，11，26，36，31，46)，取6顆牙位各研究指標(biāo)的均值來(lái)代表該患者的牙周情況，從而保證實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的科學(xué)性。用濾紙條法收集所有受試牙的齦溝液，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)雙抗體夾心法檢測(cè)齦溝液中IL-17的濃度，并與各臨床指標(biāo)作相關(guān)性檢驗(yàn)。<

5、br>　　結(jié)果:
　　1、各試驗(yàn)組血常規(guī)檢測(cè)均在正常范圍內(nèi)。
　　2、各試驗(yàn)組外周血中各項(xiàng)免疫指標(biāo)的變化:
　　正常對(duì)照組外周血中Th1/Th2/Th17細(xì)胞所占比例分別為0.48±0.26％、1.49±0.70％、0.43±0.32％。慢性牙周炎患者外周血中Th1/Th2/Th17細(xì)胞所占比例分別為2.46±0.49％、0.62±0.35％、1.64±1.15％。與健康對(duì)照組相比，Th1明顯增高(P＜0.01); T

6、h2明顯降低(P＜0.01);Th17明顯增高（P＜0.01）。侵襲性牙周炎患者外周血中Th1/Th2/Th17細(xì)胞所占比例分別為2.37±1.07％、0.57±0.15％、2.12±1.09％。與健康對(duì)照組相比，Th1明顯增高(P＜0.01); Th2明顯降低(P＜0.01); Th17明顯增高（P＜0.01）。但與慢性牙周炎組比較Th1/Th2/Th17細(xì)胞所占比例無(wú)明顯差異（P＞0.05）。
　　3、各試驗(yàn)組齦溝液內(nèi)IL-1

7、7的變化:
　　正常對(duì)照組，慢性牙周炎組和侵襲性牙周炎組齦溝液內(nèi)IL-17濃度分別為337.57±42.77 pg/μl、428.68±54.92 pg/μl、460.9±41.95 pg/μl。
　　慢性牙周炎患者齦溝液內(nèi)IL-17濃度高于正常對(duì)照組（P＜0.01），且IL-17濃度與PD成正相關(guān)關(guān)系(r=0.924，P＜0.01);與AL成正相關(guān)(r=0.930,P＜0.01)。
　　侵襲性牙周炎患者齦溝液中IL-

8、17濃度高于正常對(duì)照組(P＜0.01)，且與PD成正相關(guān)關(guān)系(r=0.857，P＜0.01);IL-17與AL無(wú)明顯相關(guān)性（P＞0.05）。侵襲性牙周炎組與慢性牙周炎組相比，IL-17濃度無(wú)明顯差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論:
　　1、慢性牙周炎和侵襲性牙周炎患者與牙周健康者比較Th2淋巴細(xì)胞降低，Th1、Th17淋巴細(xì)胞增多，機(jī)體免疫功能存在不同程度的降低。
　　2、牙周炎患者齦溝液中IL-17的濃度高于正常對(duì)照組